[發明專利]可降低血尿酸的短乳桿菌DM9218、基因片段及重組蛋白

在審

• 申請號: 201611128934.9
• 申請日: 2016-12-09
• 公開（公告）號: CN106834162A
• 公開（公告）日: 2017-06-13
• 發明（設計）人: 袁杰力;鄭鵬遠;李明;楊殿斌;王鳳嬌
• 申請（專利權）人: 大連醫科大學
• 主分類號: C12N1/20
• 分類號: C12N1/20;C12N15/11;C12N15/55;C12N9/86;C12R1/24
• 代理公司: 大連非凡專利事務所21220
• 代理人: 閃紅霞

技術領域

本發明屬于生物領域，尤其是一種對嘌呤核苷分解速率快、分解率高的可降低血尿酸的短乳桿菌DM9218、基因片段及重組蛋白。

背景技術

血尿酸不僅僅是作為判定痛風病的指標，同時也是血壓、血糖和血脂嚴重病患的一個重要判定指標，血尿酸超標與脂代謝紊亂、糖尿病、高血壓、肥胖等多種代謝性疾病密切相關?，F有高尿酸血癥除以藥物治療之外，一般都要輔以嚴格的飲食控制，即盡可能減少外源性嘌呤類物質攝入。然而，由于各種食物中嘌呤類物質含量并沒有準確的定論，特別是改善食物風味的雞精、蠔油、魚露等鮮味劑，其主要成份5’-呈味核苷酸二鈉（包括5’-鳥苷酸二鈉和5’-肌苷酸二鈉）均為嘌呤類物質，因此嚴格的飲食控制是極其困難的。

腸道乳酸菌是機體胃腸道內的有益菌群，雖然已經證實其具有對嘌呤、嘌呤代謝中間產物肌苷、鳥苷以及尿酸的吸收功能，但現有菌株對嘌呤核苷的分解速率及分解率均較低，不能夠滿足降低血尿酸的臨床要求。

發明內容

本發明是為了解決現有技術所存在的上述技術問題，提供一種對嘌呤核苷分解速率快、分解率高的可降低血尿酸的短乳桿菌DM9218、基因片段及重組蛋白。

本發明的技術解決方案是：

一種可降低血尿酸的短乳桿菌DM9218（Lactobacillus brevis），已保藏在中國微生物菌種保藏管理委員會普通微生物中心，保藏號：CGMCC No. 12797。

可降低血尿酸的短乳桿菌DM9218的 DNA序列如SEQ ID NO：1 所示。

一種上述可降低血尿酸的短乳桿菌DM9218的基因片斷，其 DNA序列如SEQ ID NO：2 所示。

一種上述可降低血尿酸的短乳桿菌DM9218的基因片斷的重組蛋白，是以短乳桿菌DM9218的DNA為模板進行PCR反應，將所得PCR產物利用基因克隆方法所得到的重組蛋白，所述PCR反應上游引物及下游引物的DNA序列分別如SEQ ID NO：3、SEQ ID NO：4所示。

本發明的短乳桿菌DM9218（Lactobacillus brevis）可快速分解肌苷、鳥苷等嘌呤核苷，其分解速率及分解率均高于現有技術，屬于國家允許應用于保健食品范疇內的益生菌，可應用于制備降低高尿酸藥物，安全、無毒副作用。

附圖說明

圖1是本發明實施例基因片段與載體連接雙酶切后的電泳圖。

圖2是本發明實施例經誘導表達后菌液的SDS-PAGE電泳圖。

圖3是本發明實施例表達的重組蛋白SDS-PAGE電泳圖。

圖4是本發明實施例純化后的目標蛋白SDS-PAGE電泳圖。

圖5是本發明實施例轉入空載體的大腸桿菌BL21菌體與肌苷、鳥苷反應液的色譜圖。

圖6是本發明實施例未誘導的重組菌株與肌苷、鳥苷反應液的色譜圖。

圖7是本發明實施例純化后的目標蛋白與肌苷、鳥苷反應液的色譜圖。

圖8是本發明實施例純化后的目標蛋白與其它物質對肌苷與鳥苷的分解率對比圖。

短乳桿菌DM9218保藏日期：2016年7月20日；

分類命名：短乳桿菌（Lactobacillus brevis）；

保藏單位：中國微生物菌種保藏管理委員會普通微生物中心（CGMCC）；

保藏單位地址：北京市朝陽區北辰西路1號院3號

保藏號：CGMCC No. 12797。

具體實施方式

實施例1：

以乳酸菌選擇培養基對鹽漬白菜（酸菜）發酵液進行培養，之后再37℃厭氧培養，按照常規方法分離得到短乳桿菌DM9218，已保藏在中國微生物菌種保藏管理委員會普通微生物中心，保藏號：CGMCC No. 12797。

實驗：

1．驗證短乳桿菌DM9218分解嘌呤核苷的能力