[發明專利]一種HPLC手性固定相及其制備方法和應用

有效

• 申請號: 201611110682.7
• 申請日: 2016-12-06
• 公開（公告）號: CN106732475B
• 公開（公告）日: 2019-05-28
• 發明（設計）人: 于冰;湯琦;叢海林
• 申請（專利權）人: 青島大學
• 主分類號: B01J20/29
• 分類號: B01J20/29;B01J20/30;B01D15/38;C07D279/26;C07D213/38;C07D279/20;C07C213/10;C07C217/32
• 代理公司: 北京東方芊悅知識產權代理事務所(普通合伙) 11591
• 代理人: 彭秀麗

本發明涉及一種HPLC手性固定相及其制備方法和應用，以單分散性良好的二氧化硅微球為原料，感光高分子重氮樹脂為表面改性劑，將β?環糊精/聚丙烯酸復合物接到二氧化硅微球表面，然后借助紫外光，將重氮樹脂與硅羥基之間的氫鍵、重氮樹脂與β?環糊精/聚丙烯酸復合物之間的氫鍵轉化為共價鍵，從而使β?環糊精穩定的接到微球表面。本發明采用的感光高分子重氮樹脂，與傳統硅烷偶聯劑相比，具有無毒害，易合成，環境友好性等特點，制得的經修飾的硅球手性固定相在高效液相色譜中對多種手性藥物對應體實現了基線分離，展現出優異手性拆分能力，可應用于多種手性色譜柱填料領域。

技術領域

本發明屬于色譜分離技術領域，具體涉及一種利用感光高分子聚合物重氮樹脂在二氧化硅微球表面修飾環糊精進行改性的HPLC手性固定相及其制備方法和應用。

背景技術

隨著社會的進步與發展，人們逐漸認識到手性藥物與生活息息相關，而手性藥物在醫藥市場的份額也逐年攀升。隨著人們對手性藥物需求的急劇增加，建立快速的手性分離方法，對藥代動力學研究和手性藥物產品質量控制都具有十分重要的意義。目前，色譜法已成為光學拆分最有用的方法。這些方法包括氣相色譜法，薄層色譜法，超臨界流體色譜法，毛細管電泳，逆流色譜，離心分配色譜法，高效液相色譜法(HPLC)。高效液相色譜憑借著其高效、高靈敏度、分析速度快、運用范圍廣等優勢成為手性分離領域一項重要技術。

液相色譜法手性拆分依據其原理可分為手性衍生法、手性流動相法和手性固定相法。手性固定相法是基于樣品與固定相表面的手性選擇劑形成暫時的非對映體配合物的能量差異或穩定性不同而達到手性分離，是不經過轉變成非對映體的直接拆分的方法。手性固定相拆分法的優點是制備方便，能適用于各類化合物的拆分。手性固定相法是目前最具優勢的光學異構體拆分方法。

在手性色譜分離中，一種理想的手性固定相應具備以下優點：分離范圍廣，適應多種結構類型的對映體分離；分析速度快，分離速率高，能快速、準確測定對映體的純度；分離具有特定性；分離選擇性和柱容量較高，具有制備分離能力。在過去的幾年中，大量的手性固定相得到了開發與應用，已合成的商品手性固定相多達上百種，但迄今為止，還沒有一種手性固定相能同時滿足上述各方面的要求。

β環糊精(Cyclodextrins，βCD)是由一定數量的葡萄糖單元通過α-1，4-糖苷鍵連接而成的環狀分子。分子整體上具有環內疏水和環外親水的特性和較強的手性識別能力而在手性藥物的分離中占有比較重要的地位。Armstrong等率先通過烷基化、酰基化和氨基甲酸酯化，增加了新的手性識別位點，使環糊精類固定相的手性色譜性能有較大的提高。而用不同的衍生化試劑對βCD的羥基進行修飾，可以提高鍵合相與手性分子之間的作用力，擴大應用范圍。環糊精類色譜固定相一般是將βCD或其衍生物鍵合到硅膠基質上，硅膠先經過硅烷化試劑預處理，常用的硅烷化試劑有γ-氨丙基三乙氧基硅烷(KH550)、y-縮水甘油醚氧丙基三甲氧基硅烷(KH560)和γ-甲基丙烯酰氧基丙基三甲氧基硅烷(KH570)。βCD 經過修飾后，常連有氨基、羥基、烯基或環氧基官能團，可與硅烷化硅膠鍵合；也有采用硅烷化試劑將βCD衍生化，再在無水條件下與硅膠的硅羥基反應，即將βCD連接到硅膠基質上。

CN103601823A公開了一種β開環糊精手性固定相的制備方法，以SiO₂微球為原料，通過γ-氨丙基三乙氧基硅烷(KH550)，三甲基氯硅烷，4,4’-二苯基甲烷二異氰酸酯(MDI)，將β-環糊精鍵合到SiO₂微球表面，得到一種β-環糊精手性固定相。CN104841408A公開了一種環糊精手性固定相及其制備方法與應用，通過點擊反應制備巰基-乙烯基鍵合環糊精手性固定相手性色譜填料，通過對環糊精6位的選擇性改性和硅膠的巰基化處理，利用高效催化劑通過點擊反應進而制備化學穩定性優異的巰基-乙烯基鍵合的環糊精手性固定相。以上兩種方法在制備環糊精手性固定相時均使用了硅烷偶聯劑，而改性過程中常用的硅烷偶聯劑往往具有一定的毒性并且對水敏感，需要控制在無水條件下使用，相對苛刻，而且過程繁瑣，耗時較長；另外，這些因素會引起環境污染等問題，大大限制了其應用。

發明內容