[發明專利]一種測定度骨化醇及其所含雜質的檢測方法

有效

• 申請號: 201611078612.8
• 申請日: 2016-11-29
• 公開（公告）號: CN106770849B
• 公開（公告）日: 2018-08-14
• 發明（設計）人: 王楊;馬國敏;張瑩;楊芳;劉倩;米靖宇;徐建國
• 申請（專利權）人: 無錫福祈制藥有限公司
• 主分類號: G01N30/34
• 分類號: G01N30/34
• 代理公司: 北京商專永信知識產權代理事務所(普通合伙) 11400
• 代理人: 高之波;儲振

本發明提供了一種測定度骨化醇及其所含雜質的檢測方法，檢測方法采用高效液相色譜檢測法，檢測方法的色譜條件為：色譜柱：以球狀蛋白用親水硅膠或者十八烷基硅烷鍵合硅膠為固定相；流動相：酸溶液與有機溶劑組成的混合溶液；流速：1.5～2.0mL/min；檢測波長：210nm；柱溫：室溫；進樣量：5～10uL；樣品濃度：3～5mg/mL；混合溶液中的酸溶液與有機溶劑的體積比隨著高效液相色譜法的洗脫進度梯度減低。在本發明中，在高效液相色譜檢測法的梯度洗脫過程中，流動相中的酸溶液與有機溶劑的體積比隨著高效液相色譜法的洗脫進度梯度減低，實現了同時對度骨化醇及其所含的三種雜質的分離和檢測，提高了分離和檢測的效率，并降低了檢測時間和主峰的相對保留時間。

技術領域

本發明涉及化學品檢測技術領域，尤其涉及一種測定度骨化醇及其所含雜質的檢測方法。

背景技術

度骨化醇(Doxercalciferol)又稱1-A羥基維生素D2，是一種維生素D2類似物主要作用于甲狀旁腺，能夠有效抑制全段甲狀旁腺激素的分泌，較小程度增加血鈣和血磷濃度，為FDA批準用于骨質疏松癥、3到4級慢性腎病患者的SHPT等新藥。度骨化醇的分子式為：C₂₈H₄₄O₂，其化學結構式如下所示：

在度骨化醇合成過程中，會產生一些相關的雜質物質如生產過程中產生的副產物或中間體或降解產物等。這些雜質可能會由于去除不完全而影響藥物的純度和質量。目前，已知的雜質有3種，分別為：有關物質1、有關物質2、有關物質3。上述三種雜質的化學結構式如下所示：

對于在度骨化醇合成工藝中引入的上述雜質(或者稱之為“副產物、中間體和相關的降解雜質”)都需要在度骨化醇原料及制劑中進行質量控制。因此，實現對度骨化醇中雜質的分離和測定，對度骨化醇原料及制劑的生產和貯存具有重要的意義。

目前對于度骨化醇有關物質的分析檢測方法有李靖，季金茍在《Chinese Journalof Analysis Laboratory》第28卷第11期中報導過。其采用十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑，以水和乙腈為流動相進行梯度洗脫，流速為1.7ml/min，檢測波長為205nm，柱溫為35℃，進樣體積為5μL。該方法的平均回收率和中間精密度均較高。但是，該文獻并沒有描述該方法對上述相關雜質的分離檢測能力，且在該方法下主峰的相對保留時間較長。

另外，Ninus Simonzadeh等人在《Determination of Degradation Products ofDoxercalciferol by Solid-Phase Extraction and Reversed-Phase HPLC》一文中報導過，以水和乙腈為流動相進行梯度洗脫，流速為1.6ml/min，檢測波長為274nm，柱溫為40℃，進樣體積為100μL。該文獻對上述有關物質1、有關物質2、有關物質3實現了分離檢測。但是該方法的檢測時間較長，主峰的相對保留時間較長，且在274nm波長處的雜質響應值較低，使測得的雜質含量比實際偏低，不利于度骨化醇原料中雜質的控制，從而最終影響到度骨化醇制劑在臨床上的治療效果。

發明內容

本發明的目的在于公開一種測定度骨化醇及其所含雜質的檢測方法，以實現對度骨化醇及其所含三種有關物質的分離和檢測，可同時實現四種物質的分離和檢測，提高分離和檢測的效率，并降低檢測時間和主峰的相對保留時間。

為實現上述目的，本發明提供了一種測定度骨化醇及其所含雜質的檢測方法，所述檢測方法采用高效液相色譜檢測法，所述檢測方法的色譜條件為：

色譜柱：以球狀蛋白用親水硅膠或者十八烷基硅烷鍵合硅膠為固定相；

流動相：酸溶液與有機溶劑組成的混合溶液；

流速：1.5～2.0mL/min；