[發(fā)明專利]一種布魯氏菌診斷標識作用的基因表達產(chǎn)物BLSJ-1及其制備方法有效
| 申請?zhí)枺?/td> | 201611077399.9 | 申請日: | 2016-11-30 |
| 公開(公告)號: | CN106749562B | 公開(公告)日: | 2020-06-09 |
| 發(fā)明(設(shè)計)人: | 朱良全;丁家波;蔣卉;彭小薇;張磊;范學(xué)政;孫翠麗 | 申請(專利權(quán))人: | 中國獸醫(yī)藥品監(jiān)察所 |
| 主分類號: | C07K14/23 | 分類號: | C07K14/23;C12N15/31;C12N15/70;G01N33/68;G01N33/569 |
| 代理公司: | 北京君智知識產(chǎn)權(quán)代理事務(wù)所(普通合伙) 11305 | 代理人: | 鄭明 |
| 地址: | 100081 *** | 國省代碼: | 北京;11 |
| 權(quán)利要求書: | 查看更多 | 說明書: | 查看更多 |
| 摘要: | |||
| 搜索關(guān)鍵詞: | 一種 布魯氏菌 診斷 標識 作用 基因 表達 產(chǎn)物 blsj 及其 制備 方法 | ||
1.一種布魯氏菌診斷標識作用基因的表達產(chǎn)物BLSJ-1的應(yīng)用,其特征在于將該診斷標識作用基因的表達產(chǎn)物制備為區(qū)分動物布魯氏菌疫苗免疫和自然感染血清檢測抗原;
所述診斷標識作用基因的表達產(chǎn)物是由布魯氏菌S2株基因編號為489054867的基因,表達為“通用應(yīng)激蛋白(universal stress protein)”;該基因長度:450bp;其表達產(chǎn)物的蛋白分子量15.5kDa;其基因序列為序列1。
2.如權(quán)利要求1所述的一種布魯氏菌診斷標識作用基因的表達產(chǎn)物BLSJ-1的應(yīng)用,其特征在于其中表達產(chǎn)物BLSJ-1的制備方法包括下列步驟:(1)基因篩選:從布魯氏菌S2株基因組中,通過免疫蛋白組學(xué)方法,篩選鑒定出上述權(quán)利1的基因;(2)基因表達:通過設(shè)計序列2和序列3的引物,經(jīng)過常規(guī)PCR克隆擴增,將其置于pGEX6p-1載體中誘導(dǎo)表達;(3)表達產(chǎn)物純化:通過谷胱甘肽S轉(zhuǎn)移酶(GST)親和層析柱與谷胱甘肽梯度洗脫法純化表達產(chǎn)物,獲得所需抗原,被命名為BLSJ-1。
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