[發明專利]一種植物線蟲永久玻片的制作方法在審
| 申請號： | 201611073300.8 | 申請日： | 2016-11-29 |
| 公開（公告）號： | CN106614520A | 公開（公告）日： | 2017-05-10 |
| 發明（設計）人： | 顧建鋒;何潔;劉樂樂;陳先鋒;段維軍 | 申請（專利權）人： | 寧波檢驗檢疫科學技術研究院 |
| 主分類號： | A01N1/00 | 分類號： | A01N1/00 |
| 代理公司： | 北京高沃律師事務所11569 | 代理人： | 王加貴 |
| 地址： | 315000 *** | 國省代碼： | 浙江;33 |
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| 摘要： | |||
| 搜索關鍵詞： | 一種 植物 線蟲 永久 制作方法 | ||
1.一種植物線蟲永久玻片的制作方法，其特征在于，包括以下步驟：
a、將含有線蟲的水溶液在55-60℃溫浴2-3min后離心，分離水層得到線蟲液，將所述線蟲液在固定液中浸泡24h以上；
b、將含有線蟲的固定液離心，分離上層固定液得到固定后的線蟲，將固定后的線蟲與1～5ml甘油水溶液混合置于24孔細胞培養皿中，再將所述培養皿在35℃～40℃條件下恒溫放置40h～50h，得到完全脫水浸泡于甘油中的線蟲；其中，所述甘油水溶液包括體積比為1:15～25的甘油與水；
c、在載玻片上滴加甘油，將所述完全脫水浸泡于甘油中的線蟲移至載玻片的甘油滴中，在甘油滴兩邊放蠟塊，加蓋玻片，加熱至蠟塊融化后冷卻。
2.根據權利要求1所述的制作方法，其特征在于，所述固定液包括體積比為5～15:1～5:65～94的40wt％甲醛、甘油和水。
3.根據權利要求1所述的制作方法，其特征在于，步驟a或步驟b中，所述離心的轉速獨立地為2000～4000r/min，離心時間獨立地為1～5min。
4.根據權利要求1所述的制作方法，其特征在于，步驟c中，移至甘油滴中央的線蟲為已完全脫水的雌、雄線蟲各若干條，排列均勻。
5.根據權利要求1所述的制作方法，其特征在于，步驟c中，所述加熱步驟具體為，將含有蠟塊的玻片置于50～70℃的加熱板上加熱。
6.根據權利要求1或5所述的制作方法，其特征在于，步驟c中，所述加熱的時間為20～40s。
7.根據權利要求1所述的制作方法，其特征在于，步驟c中，還包括將所述冷卻后的玻片貼上標簽，所述標簽上包括樣品號、寄主、產地、制作日期。
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