[發(fā)明專利]一種以雞頭黃精鱗莖為外植體的種苗快速繁殖方法有效
| 申請(qǐng)?zhí)枺?/td> | 201611072907.4 | 申請(qǐng)日： | 2016-11-29 |
| 公開(kāi)（公告）號(hào)： | CN106489740B | 公開(kāi)（公告）日： | 2018-03-13 |
| 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人： | 郭生虎;朱永興;陳虞超;關(guān)雅靜;石磊;張農(nóng) | 申請(qǐng)（專利權(quán)）人： | 寧夏農(nóng)林科學(xué)院 |
| 主分類號(hào)： | A01H4/00 | 分類號(hào)： | A01H4/00;A01G31/00;A01G24/28;A01G24/25;A01G24/15 |
| 代理公司： | 廣州市一新專利商標(biāo)事務(wù)所有限公司44220 | 代理人： | 張芳 |
| 地址： | 750002 寧夏回族*** | 國(guó)省代碼： | 寧夏;64 |
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| 摘要： | |||
| 搜索關(guān)鍵詞： | 一種 雞頭 黃精 鱗莖 外植體 種苗 快速 繁殖 方法 | ||
1.一種以雞頭黃精鱗莖為外植體的種苗快速繁殖方法，其特征在于，包括如下步驟：
(1)外植體的選擇與消毒：選擇秋季新鮮、成熟的當(dāng)年生雞頭黃精鱗莖球，除去基部殘余的老根，先用流水沖洗30min，然后投到體積份數(shù)為2％的次氯酸鈉溶液中浸泡20min，再用清水沖洗干凈，接著轉(zhuǎn)入超凈工作臺(tái)，在超凈工作臺(tái)上先用75％的乙醇浸泡20s，然后用無(wú)菌水沖洗3-4遍，再轉(zhuǎn)入0.1％的升汞溶液中浸泡8min，該升汞溶液每升含0.1mL吐溫20，然后用無(wú)菌水沖洗4-5次后備用；
(2)材料的處理：將即步驟(1)得到的的鱗莖球用無(wú)菌濾紙吸干表面的水分，在超凈工作臺(tái)內(nèi)用刀刮去栓皮層，然后將鱗莖球先橫切為2塊，保留有萌動(dòng)芽的上半部分，再將下半部分縱切為2塊，將這3塊鱗莖作為外植體備用；
(3)啟動(dòng)培養(yǎng)：在無(wú)菌條件下將步驟(2)處理好的外植體接種到啟動(dòng)培養(yǎng)基中，每瓶接種1塊，該培養(yǎng)基是在Ms培養(yǎng)基中額外添加了1.0mg/L～3.0mg/L的6-BA、0.5mg/L～1.0mg/L的NAA和10.0mg/L～20mg/L病毒唑，蔗糖30g/L，瓊脂粉5.0g/L，調(diào)整pH值為5.8，培養(yǎng)溫度18±1℃，置暗培養(yǎng)條件下培養(yǎng)12-15天，直至鱗莖膨大，切面少量愈傷化；
(4)鱗莖分化：將步驟(3)得到的培養(yǎng)的鱗莖整塊轉(zhuǎn)入鱗莖分化培養(yǎng)基，該鱗莖分化培養(yǎng)基以Ms培養(yǎng)基為基本培養(yǎng)基，額外添加細(xì)胞分裂素6-BA 1.0mg/L～2.0mg/L、生長(zhǎng)素NAA 0.5mg/L～1.0mg/L和病毒唑5.0mg/L～10.0mg/L，蔗糖40.0g/L，瓊脂粉5.0g/L，調(diào)整pH值為5.8，培養(yǎng)溫度22±1℃，置光照培養(yǎng)箱中，每天光照14h，光照強(qiáng)度1500Lx～2000Lx，培養(yǎng)40-50天，直至從膨大的鱗莖塊周圍分化出小的鱗莖球；
(5)繼代增殖培養(yǎng)：切取步驟(4)誘導(dǎo)產(chǎn)生的小的鱗莖球，接種到鱗莖球增殖培養(yǎng)基上，該鱗莖球增殖培養(yǎng)基以Ms培養(yǎng)基為基本培養(yǎng)基，額外添加6-BA 0.5mg/L～1.0mg/L、NAA 0.1mg/L～0.5mg/L，蔗糖40g/L，瓊脂粉5.0g/L，pH值為5.8，培養(yǎng)溫度22±1℃，置光照培養(yǎng)箱中，每天光照14h，光照強(qiáng)度1500Lx～2000Lx，培養(yǎng)20-30天，直至部分小鱗莖球長(zhǎng)出分蘗小苗，此時(shí)升高培養(yǎng)溫度至24±1℃，繼續(xù)培養(yǎng)15-20天，直至小鱗莖基部增殖出一簇一簇的小鱗莖球；
(6)生根培養(yǎng)：將步驟(5)得到的長(zhǎng)出分蘗綠苗的鱗莖球切割出來(lái)，分別接種于生根培養(yǎng)基中進(jìn)行生根培養(yǎng)，該生根培養(yǎng)基以1/2Ms培養(yǎng)基為基本培養(yǎng)基，額外添加0.5mg/L的NAA和0.1mg/L的IBA，0.5g/L的活性炭，蔗糖30g/L，瓊脂粉5.0g/L，調(diào)整pH值為5.8，培養(yǎng)溫度24±1℃，置光照培養(yǎng)箱中，每天光照14h，光照強(qiáng)度1500Lx～2000Lx，培養(yǎng)25-30天，小苗長(zhǎng)至3.0cm-4.0cm高，長(zhǎng)出5-8條根，準(zhǔn)備進(jìn)行試管苗移栽；
(7)煉苗移栽：將步驟(6)中生根的試管苗開(kāi)蓋后置于溫室中，保持溫度23℃～26℃，濕度65％～75％，光強(qiáng)2000Lx～2500Lx的條件下煉苗5～7天，然后取出苗，在清水中洗掉培養(yǎng)基，移栽到配制好的移栽基質(zhì)中，該移栽基質(zhì)由草炭土、椰糠和蛭石按5:2:3的體積比例混合，置塑料小拱棚中，保持濕度75％左右，光強(qiáng)2000Lx～2500Lx，保持通風(fēng)，培養(yǎng)25-30天，移去拱棚，增加光強(qiáng)從而使試管苗逐漸適應(yīng)自然光照條件，待葉片硬化后，將雞頭黃精種苗移栽于大田即可。
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