[發明專利]一種用于生產多不飽和脂肪酸的溫度敏感型菌株及應用

有效

• 申請號: 201611054021.7
• 申請日: 2016-11-25
• 公開（公告）號: CN106754403B
• 公開（公告）日: 2020-06-26
• 發明（設計）人: 劉浩;王海霞;何希宏;孫春杰
• 申請（專利權）人: 天津科技大學
• 主分類號: C12N1/14
• 分類號: C12N1/14;C12P7/64;C12R1/645
• 代理公司: 天津市三利專利商標代理有限公司 12107
• 代理人: 李蕊

本發明提供了一種用于生產多不飽和脂肪酸的溫度敏感型菌株，保藏編號為CGMCC 11808，經過18S rDNA鑒定，該菌株為被孢霉屬，為溫度敏感型絲狀真菌，其最適的生長溫度為25℃，溫度敏感范圍為25℃?28℃，經過18S rDNA鑒定，該菌株為被孢霉屬高山被孢霉，該菌株在20℃?25℃時可以生長良好，當溫度高于26℃時，其菌絲不能正常延伸。當溫度高于27℃時，其菌落明顯變??；當溫度高于30℃時，則該菌完全不生長。在25℃條件下，以發酵培養基發酵該菌株，發現其可產生多種不飽和脂肪酸。

技術領域

本發明涉及生物工程領域，尤其是一株用于生產多不飽和脂肪酸的溫度敏感型菌株及應用。

背景技術

適宜的溫度是微生物生長所必需的條件，不同的溫度對微生物的能量代謝途徑可能造成一定影響。不同微生物其最適的生長溫度也不一樣，從而它們的遺傳物質也會有一定差異。微生物外在環境溫度對微生物細胞膜的磷脂中飽和脂肪酸及不飽和脂肪酸的比例亦有影響。當外界環境溫度下降時，不飽和脂肪酸的比例會隨之增高，而飽和脂肪酸的比例會下降。因為不飽和脂肪酸含有較飽和脂肪酸多的雙鍵，熔點較低，所以在外界環境溫度降低時，細胞膜中不飽和脂肪酸比例的增加，可能具有使細胞膜流動性增加的功能，使細胞膜正常生理功能得以部分維持。當外界環境溫度降低時，對微生物的影響主要還是在細胞中的蛋白質上，因蛋白質的斥水鍵強度在低溫時有減弱的情形，細胞中蛋白質的立體結構會因之改變，使蛋白質酵素與其它分子如一些反應物間的作用方式或親和力發生變化，造成蛋白質的功能及其調控方式與正常環境溫度不相同，因而影響微生物在低溫時生理代謝無法正常運作。

溫度敏感菌株在培養基上對溫度敏感，這暗示溫度改變時會影響某些蛋白的生成。正常溫度下其蛋白可以正確構象，一旦溫度升高則引起其蛋白變性。而且，溫度敏感型菌株，其細胞內可能存在某些特定的溫度敏感元件，可以調控某些基因的表達及終止。這對于細胞呼吸、凋亡等過程的機理研究將有一定意義。

發明內容

本發明所要解決的技術問題在于提供一株用于生產多不飽和脂肪酸的溫度敏感型菌株。

本發明所要解決的另一技術問題在于提供上述溫度敏感型菌株的應用。

為解決上述技術問題，本發明的技術方案是：

一株用于生產多不飽和脂肪酸的溫度敏感型菌株，保藏編號為CGMCC 11808。

優選的，上述用于生產多不飽和脂肪酸的溫度敏感型菌株，18S rDNA序列為序列表4001所示序列，經過18S rDNA鑒定，該菌株為被孢霉屬。

上述溫度敏感型菌株是從西藏雪山取樣，經過初篩、分離、純化菌株，再經過篩選及性能分析的步驟，獲得了一株溫度敏感型菌株。該菌株與菌種保藏中心的高山被孢霉ATCC 16266形態、最適生長溫度等方面存在差異。

優選的，上述用于生產多不飽和脂肪酸的溫度敏感型菌株，為溫度敏感型菌株，該菌株在溫度為25℃時可以正常生長，當溫度高于26℃時其菌絲不能夠正常延伸，溫度高于27℃時，其菌落形態明顯變小，溫度高于30℃時則完全不生長。

上述用于生產多不飽和脂肪酸的溫度敏感型菌株的應用，所述菌株在25℃的條件下以發酵培養基發酵，經氣相色譜檢測其可產生多種不飽和脂肪酸。

優選的，上述溫度敏感型菌株的應用，所述不飽和脂肪酸為棕櫚酸、十七烷酸、硬脂酸、油酸、亞油酸或γ-亞麻酸。

上述用于生產多不飽和脂肪酸的溫度敏感型菌株的發酵方法，高山被孢霉菌株孢子接種到PDA平板上：25℃黑暗培養4-5d，將孢子洗下后將孢子濃度調整到1×10⁵/mL并接種到種子培養基，25℃、200rpm培養24h，按10％接種量接種到發酵培養基中25℃、200rpm發酵培養5d。