[發(fā)明專利]可實(shí)現(xiàn)雞血清白蛋白鑒定及絕對(duì)定量的試劑盒及測定方法

有效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 201611027830.9
• 申請(qǐng)日: 2016-11-18
• 公開（公告）號(hào): CN106596818B
• 公開（公告）日: 2018-05-22
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 姜泓;王守云;封聰;袁明美;陳默
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 中國醫(yī)科大學(xué)
• 主分類號(hào): C07K14/47
• 分類號(hào): C07K14/47
• 代理公司: 沈陽智龍專利事務(wù)所(普通合伙) 21115
• 代理人: 周智博;宋鐵軍

可實(shí)現(xiàn)雞血清白蛋白鑒定及絕對(duì)定量的試劑盒及測定方法,該試劑盒由標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)和反應(yīng)試劑兩部分組成，標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)包括：特征肽段及其內(nèi)標(biāo)肽段；反應(yīng)試劑包括：碳酸氫銨、二硫蘇糖醇、碘乙酰胺、胰蛋白酶、甲酸。通過將含雞血清白蛋白樣品與反應(yīng)試劑按一定的體積比混合，溫育振蕩后，使之發(fā)生酶解反應(yīng)，再將標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)和/或最終酶解產(chǎn)物分別注入高效液相色譜?串聯(lián)質(zhì)譜儀中，根據(jù)母離子和子離子的質(zhì)荷比（m/z）及特征肽段的保留時(shí)間（tR）進(jìn)行定性鑒別，通過色譜峰面積變化測算出雞血清白蛋白的絕對(duì)含量。

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明涉及一種可實(shí)現(xiàn)雞血清白蛋白鑒定及絕對(duì)定量的檢測試劑盒及測定方法，屬于檢驗(yàn)測定技術(shù)領(lǐng)域。

背景技術(shù)

血清白蛋白約占血漿總蛋白的40～60％，是血漿中主要載體，起維持滲透壓、pH緩沖、載體和營養(yǎng)作用，許多水溶性差的物質(zhì)可以通過與其結(jié)合而被運(yùn)輸，如，膽紅素、長鏈脂肪酸、膽汁酸鹽、前列腺素、類固醇激素、金屬離子及藥物等。有關(guān)檢測血清白蛋白的檢測方法有免疫雙擴(kuò)散法、免疫電泳法、雙縮尿法、鎢酸沉淀法和毛細(xì)管電泳法等。這些方法有易污染、背景值高的缺點(diǎn)，常使檢測靈敏度降低，并且特異性較差；高壓毛細(xì)管電泳法雖有較高準(zhǔn)確度，但常易受到分子量大小接近的蛋白干擾，使檢測特異性、靈敏度降低，并且檢測時(shí)間較長，不適合痕/微量羊血清白蛋白的檢測。目前，關(guān)于檢測雞血清白蛋白的特異性方法報(bào)道較少。

發(fā)明內(nèi)容

技術(shù)問題：本發(fā)明的目的是提供一種雞血清白蛋白檢測試劑盒，給出一種采用本試劑盒可以克服現(xiàn)有技術(shù)缺點(diǎn)的雞血清白蛋白的鑒定和含量測定的方法。該試劑盒給出了檢測雞血清白蛋白的標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)和對(duì)含血清白蛋白樣品進(jìn)行酶解反應(yīng)的反應(yīng)試劑。可將標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)和/或酶解反應(yīng)產(chǎn)物(或含內(nèi)標(biāo)物質(zhì))注入(超)高效液相色譜-質(zhì)譜儀中進(jìn)行雞血清白蛋白含量測定。本發(fā)明提供了一種專屬性強(qiáng)、精密度高、結(jié)果準(zhǔn)確可靠、操作簡便，可在臨床上用于樣品中雞血清白蛋白含量測定的一種檢測試劑盒及檢測方法。

技術(shù)方案：

一種可實(shí)現(xiàn)雞血清白蛋白鑒定及絕對(duì)定量的試劑盒，其特征在于：包括標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)：

標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)包括特征肽段及其內(nèi)標(biāo)肽段，肽段序列為：

選擇方式如下：

(1)所述標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)特征肽段單獨(dú)使用，或與其他特征肽段配成兩種或三種混合特征肽段使用；

(2)內(nèi)標(biāo)肽段單獨(dú)使用，或與其他特征肽段配成兩種或多種混合內(nèi)標(biāo)物質(zhì)使用。

(3)所述標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)特征肽段與其內(nèi)標(biāo)肽段配成的內(nèi)標(biāo)物質(zhì)，是單一內(nèi)標(biāo)物質(zhì)、雙混合內(nèi)標(biāo)物質(zhì)或三混合內(nèi)標(biāo)物質(zhì)，使用其中的一種、兩種或三種；

(4)、內(nèi)標(biāo)肽段與其他內(nèi)標(biāo)肽段配成兩種或多種混合使用。

該試劑盒還包括反應(yīng)試劑：

反應(yīng)試劑，由以下成分組成