[發(fā)明專利]一種繁育考來木的方法

在審

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 201611003402.2
• 申請(qǐng)日: 2016-11-15
• 公開（公告）號(hào): CN106718874A
• 公開（公告）日: 2017-05-31
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 張志錄;劉中華;張炎;蔡清;楊金鶴
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 平頂山學(xué)院
• 主分類號(hào): A01H4/00
• 分類號(hào): A01H4/00
• 代理公司: 長沙星耀專利事務(wù)所43205
• 代理人: 許伯嚴(yán)

1.一種繁育考來木的方法，其特征在于，包括以下步驟：

S1、外植體消毒處理：選擇生長健壯、無病蟲害的考來木的帶腋芽枝條為外植體，先用0.5 mg/L 的GA3浸泡外植體10～20min，然后將外植體用洗衣粉水浸泡10～30min，然后自來水漂洗干凈，然后置于超凈臺(tái)上，用75%酒精消毒30～60S，無菌水沖洗4～6遍后再用2.5%次氯酸鈉溶液消毒10～30min，消毒濾紙吸干水分后用；

S2、愈傷組織誘導(dǎo)：將步驟S1消毒處理好的外植體切取0.5cm左右長度的莖段接種于誘導(dǎo)培養(yǎng)基中進(jìn)行全黑暗、19～22℃、空氣相對(duì)濕度為50%～60%的條件下培養(yǎng)8～12天，然后再置于普通日光燈為光源、光照強(qiáng)度為 1500-20001x 下，每日光照15小時(shí)，溫度 20-25℃、濕度為 55％～60％，培養(yǎng)2～4天至愈傷組織形成，然后置于每天光照12～14小時(shí)、光照強(qiáng)度為1000～2000lx、培養(yǎng)溫度為25～28℃，空氣相對(duì)濕度為75%的條件下培養(yǎng)30天后統(tǒng)計(jì)誘導(dǎo)率；

S3、增殖培養(yǎng)：將步驟S2誘導(dǎo)培養(yǎng)得到的愈傷組織轉(zhuǎn)接到增殖培養(yǎng)基中進(jìn)行繼代，接種后置于每天光照12～14小時(shí)，光照強(qiáng)度為2000～3000lx，置于培養(yǎng)溫度為25～28℃，空氣相對(duì)濕度為75%的條件下培養(yǎng)30天后統(tǒng)計(jì)增殖情況；

S4、叢生芽誘導(dǎo)：將步驟S3繼代得到的愈傷組織轉(zhuǎn)接至芽誘導(dǎo)培養(yǎng)基中進(jìn)行誘導(dǎo)分化培養(yǎng)，接種后置于每天光照12～14小時(shí)，光照強(qiáng)度為2000～3000lx，置于培養(yǎng)溫度為25～28℃，空氣相對(duì)濕度為75%的條件下培養(yǎng)30天后統(tǒng)計(jì)分化情況；

S5、生根培養(yǎng)：將經(jīng)步驟S4分化培養(yǎng)得到的叢生芽轉(zhuǎn)接至生根培養(yǎng)基中進(jìn)行生根，接種后置于每天光照12～14小時(shí)，光照強(qiáng)度為2000～3000lx，置于培養(yǎng)溫度為25～28℃，空氣相對(duì)濕度為75%的條件下培養(yǎng)30天后統(tǒng)計(jì)生根情況；

S6、煉苗移栽：叢生芽生根20天后，具備發(fā)達(dá)健壯的根時(shí)將組培苗不揭瓶蓋在自然光下煉苗，移栽時(shí)用鑷子取出組培苗，小心洗凈基部殘留的培養(yǎng)基，選擇健壯苗移栽到消過毒的輕基質(zhì)中，澆足水，遮蔭處理，移栽后經(jīng)常噴水，保持空氣濕度，植株成活后移至珍珠巖、草炭土的混合基質(zhì)中定植。

2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種繁育考來木的方法，其特征在于，步驟S1中，所述的外植體為帶腋芽的枝條切取成長度為0.5～2.5cm，腋芽位于中間的莖段，切去葉片，保留兩片葉柄基部保護(hù)腋芽生長點(diǎn)，進(jìn)行消毒處理。

3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種繁育考來木的方法，其特征在于，步驟S2中，所述的誘導(dǎo)培養(yǎng)基為：MS+1.0～3.0mg/L6-BA+0.1～0.5mg/LNAA+0.1～0.5g/LLH+1～2g/LPVP+25～30g/L蔗糖+3.5～6.0g/L瓊脂，pH為5.4～5.8。

4.根據(jù)權(quán)利要求3所述的一種繁育考來木的方法，其特征在于，所述的誘導(dǎo)培養(yǎng)基中包含納米活性炭2～4g/L、PVP 0.5～1 g/L和檸檬酸4～6mg/L。

5.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種繁育考來木的方法，其特征在于，步驟S3中，所述的增殖培養(yǎng)基為：MS+1.0～2.0mg/L6-BA+0.1～0.2mg/LNAA+25～30g/L蔗糖+3.5～6.0g/L瓊脂，pH為5.4～5.8。

6.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種繁育考來木的方法，其特征在于，步驟S4中，所述的芽誘導(dǎo)培養(yǎng)基為：MS+0.5～1.0mg/LNAA+0.1～0.5mg/L6-BA+20～30g/L蔗糖+3.5～6.0g/L瓊脂，pH為5.4～5.8。

7.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種繁育考來木的方法，其特征在于，步驟S5中，所述的生根培養(yǎng)基為：1/2MS+1.0～5.0mg/LNAA+20～30g/L蔗糖+3.5～6.0g/L瓊脂，pH為5.4～5.8。

8.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種繁育考來木的方法，其特征在于，步驟S6中，將生根試管苗置于自然環(huán)境中6～10 天，取出洗凈根部，用500～600 倍托布津水溶液浸泡數(shù)秒，移栽到草炭土、珍珠巖的混合基質(zhì)中，起始6～10 天內(nèi)保持苗的葉面濕潤并適當(dāng)遮陽，其后按干透濕透的原則澆水，逐漸加強(qiáng)光照至全光照，進(jìn)行栽種。

9.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種繁育考來木的方法，其特征在于，步驟S6中的輕基質(zhì)由以下重量份數(shù)的各組分組成：熟田土40～60份、稻草灰15～30份、樹皮粉末25～35份、膨化珍珠巖6～10份、發(fā)酵稻殼15～20份、椰糠10～20份 ；沼渣8～12份、長效復(fù)合緩釋肥2～5份。