[發明專利]一種復合型合生元微生態制劑及其制備方法

在審

• 申請號: 201610990925.4
• 申請日: 2016-11-10
• 公開（公告）號: CN106720938A
• 公開（公告）日: 2017-05-31
• 發明（設計）人: 劉君;劉華康;王晗;陳靜;羅雁;劉永明;張薇
• 申請（專利權）人: 四川理工學院
• 主分類號: A23K10/18
• 分類號: A23K10/18;A23K10/20;A23K20/105;A23K20/163;A23K20/142;A23K20/147;A23K20/174;A23K20/20;A23K20/26
• 代理公司: 北京國坤專利代理事務所(普通合伙)11491
• 代理人: 姜彥

技術領域

本發明屬于生物制劑領域，尤其涉及一種復合型合生元微生態制劑及其制備方法。

背景技術

目前，我國合生元微生態制劑在動物的生產中的應用研究還較少，畜牧業動物食用添加劑中微生態制劑的使用情況還較少，人們對微生態制劑適用添加比較模糊，即混淆有針對性的添加對象，導致動物生長的效果往往低于預期效果。

在文獻“羅佳捷，張彬，王潔.合生素在動物生產中的應用研究進展.動物營養.2011(4).”中，作者列舉了合生元微生態制劑在動物生產中的應用，采用宏觀方式清晰地比較出合生元微生態制劑與傳統的動物食用添加劑之間的區別。

發明內容

本發明的目的在于提供一種復合型合生元微生態制劑及其制備方法，旨在解決目前動物用合生元微生態制劑吸收利用率低，無針對性，簡單機械混合且益生元與所添加的益生菌對應關系不明確，應用效果差，將益生菌或益生元直接作為添加劑的不足和對動物腸道微生態系統影響不明確問題。

本發明是這樣實現的，一種復合型合生元微生態制劑，該復合型合生元微生態制劑組分為腸道益生菌、益生菌營養物質、低聚糖；所述各組分按重量比為：腸道益生菌為0.02-15g/kg，益生菌營養物質為0.05-80g/kg，低聚糖為0.01-90g/kg；所述腸道益生菌組分由乳桿菌、雙歧桿菌、變量X菌組成，所述變量X菌為芽孢桿菌、酵母菌、乳酸菌﹑糞鏈球菌、嗜熱鏈球菌﹑乳鏈球菌、乳酸片球菌、腸球菌、擬桿菌﹑鼠李糖桿菌中的任意一種或幾種細菌的混合物；根據不同的動物有機體變量X菌的添加量進行調整。(標準菌株均購自北京北納創聯生物技術研究院)

進一步，所述低聚糖為含酸化劑的低聚糖。

進一步，當變量X菌為零時該復合型合生元微生態制劑用于合生元母本，在此母本基礎上添加與不同動物相應的益生菌和相應的益生菌對應的益生元制成專有動物合生元；益生菌和相應的益生菌對應的益生元按重量比為：益生菌：益生元＝1:1～5，所述益生元為木寡糖、寡甘露糖、果寡糖、低聚異麥芽糖、乳寡糖、乳酮糖、低聚半乳糖、大豆低聚糖﹑低聚殼聚糖中的一種或多種混合物。

本發明另一目的在于提供一種復合型合生元微生態制劑的制備方法，所述復合型合生元微生態制劑的制備方法，首先分別在不同的環境下篩選出腸道益生菌，通過對篩選出的腸道益生菌的功能和生物學特性比較，并且在模擬腸道環境下比較益生菌的活菌數變化，篩選出最佳的菌株，將各類低聚糖含量進行測定，選擇出最佳添加量，將腸道益生菌和低聚糖混合制成復合型合生元微生態制劑。

進一步，該復合型合生元微生態制劑的制備方法具體包括：

步驟一、從動物的胃腸道、養殖場附近的土壤、喂養牲畜的酒糟中分離篩選出乳桿菌、雙歧桿菌、變量X菌的益生菌，分析分離得到的乳桿菌、雙歧桿菌、變量X菌的益生菌形態特征，并進行菌種的鑒定；

步驟二、將分離得到的乳桿菌、雙歧桿菌、變量X菌的益生菌進行生物學特性、功能的比較以及安全性的鑒定，并進行體外益生效果評價，初步篩選優質益生菌；

步驟三、在人工模擬的胃腸道液中培養初步篩選后的優質益生菌，測定各類益生菌的活菌數，繁殖代數，進行更進一步的篩選，選出最佳的菌株；

步驟四：根據益生菌的種類、各類益生元的功能特性以及與相應益生菌的利用程度選擇由低聚糖和酸化劑組成的益生元，優化出低聚糖和酸化劑最佳添加量；

步驟五、對步驟三篩選的益生菌株與步驟四選擇出的益生元，再加入益生菌營養物質混合制成復合型合生元微生態制劑。

進一步，步驟一中進行菌種的鑒定包括：

常規鑒定：乳桿菌為革蘭氏陽性無芽孢桿菌，細胞形態呈鏈桿狀或球桿狀，雙歧桿菌為革蘭氏陽性的無芽孢桿菌，長短不等，雙歧桿菌有V字型或Y字型，排列呈單、雙、短鏈、X、Y、V或柵狀；

生物學鑒定：提取細菌DNA或RNA，采取PCR技術進行DNA或者RNA鑒定。

進一步，步驟二中初步篩選方法為：根據生物學鑒定明確各分離菌株是否為目標益生菌；所述目標益生菌為：乳桿菌選用戊糖乳桿菌或植物乳桿菌，雙歧桿菌的選育為雙叉雙歧桿菌、嬰兒雙歧桿菌(B.infantis)、青春雙歧桿菌(B.adolescentis)、長雙歧桿菌(B.longum)和短雙歧桿菌(B.breve)中的一種，芽孢桿菌選用能產生多種消化酶的枯草芽孢桿菌、地衣芽孢桿菌中的一種；酵母菌選用飼料酵母、面包酵母、茶酵母或者啤酒酵母中的一種，盡量避免使用目前尚無定論，作用有爭議的細菌，如釀酒酵母等。