[發明專利]一種煙草及煙草制品中馬來酰肼殘留量的檢測方法

有效

• 申請號: 201610985773.9
• 申請日: 2016-11-09
• 公開（公告）號: CN106526024B
• 公開（公告）日: 2019-06-28
• 發明（設計）人: 熊巍;陶曉秋;龐夙;韶濟民;張海燕;楊雪
• 申請（專利權）人: 中國煙草總公司四川省公司
• 主分類號: G01N30/02
• 分類號: G01N30/02
• 代理公司: 成都為知盾專利代理事務所(特殊普通合伙) 51267
• 代理人: 楊宜付

本發明公開一種煙草及煙草制品中馬來酰肼截留量的檢測方法，所述煙草及煙草制品包括煙葉和卷煙煙絲，包括以下步驟：配制標準溶液、鹽酸回流提取、分散固相萃取純化、UPLC?MS/MS分析測定。本發明針對煙草抑芽劑馬來酰肼，利用超高效液相色譜?串聯質譜儀（UPLC–MS/MS），建立UPLC–MS/MS快速分析煙草及煙草制品中馬來酰肼殘留量的方法。選取的串聯質譜，分離度和靈敏度都明顯高于標準方法（YC/T 405.5?2011）的紫外檢測器。

技術領域

本發明屬于農藥殘留檢測領域，涉及煙草及煙草制品中馬來酰肼殘留量的檢測方法。

背景技術

馬來酰肼又名抑芽單，是一種植物生長調節劑，煙草生產中常用其抑制煙草側芽生長，國外應用比較廣泛。由于其在煙草大田生長期的長期多次施用，從而會導致其在初烤煙葉中的殘留, 煙葉中馬來酰肼的殘留會對吸煙者產生健康風險，國際煙草科學研究合作中心（CORESTA）將其納入煙草農藥指導性殘留限量名單118名單）。

煙草中馬來酰肼殘留量的分析方法主要有分光光度法（ISO4876-1980），高效液相色譜法（HPLC，YC/T405.5-2011）、氣相色譜法（GC）和膠束液相色譜（MLC），煙草行業目前應用較為廣泛的測定煙草中馬來酰肼殘留量的方法為HPLC-UV法（YC/T405.5-2011），此方法選取紫外檢測器，靈敏度較低，方法的前處理非常復雜，且選取的是外標法定量，方法的準確度相對較低，容易出現假陽性檢出現象。因此，準確定量分析煙草及煙草制品中馬來酰肼具有較為重要的意義。

發明內容

鑒于此，本發明目的在于提供一種準確定量檢測馬來酰肼的方法，特別是測定煙草及煙草制品中馬來酰肼的方法。

發明人通過長期的探索和嘗試，以及多次的實驗和努力，不斷的改革創新，為解決以上技術問題，本發明提供的技術方案是，提供一種煙草及煙草制品中馬來酰肼截留量的檢測方法，所述煙草及煙草制品包括煙葉和卷煙煙絲，包括以下步驟：

步驟a）配制標準溶液；

準確稱取馬來酰肼標準品, 精確至0.0001g，用超純水溶解定容，制得標準儲備液；

稀釋標準儲備液得到標準工作液，儲存于棕色玻璃瓶中，冷凍保存備用；

用超純水準確配置氘代內標標準儲備液，儲存于棕色玻璃瓶中，冷凍保存；

取一定量的內標標準儲備液，用超純水稀釋定容，制得內標標準工作液；

標準工作液和內標標準工作液冷藏保存；

步驟b）鹽酸回流提取；

稱取試樣于圓底燒瓶中，加入鹽酸提取液，再加入內標標準工作液；將圓底燒瓶放置于加熱套或者油浴鍋中，圓底燒瓶上安裝球形冷凝管，加熱回流；控制回流速度，使蒸汽升至球形冷凝管第二球處，回流穩定后開始計時；

步驟c）分散固相萃取純化；

從圓底燒瓶中移取上清液于旋蓋離心管中，分別向離心管中加入N-丙基乙二胺吸附劑，漩渦振蕩混合，吸取上清液經有機相濾膜過濾后用超純水稀釋定容待測；

步驟d）UPLC-MS/MS分析測定；

分別對前述工作液進行UPLC-MS/MS分析，并對各標樣峰面積與內標的峰面積的比值（y）和其濃度（x）進行線性回歸分析，得到標準曲線；

色譜條件：Atiantis UPLC HSS T3超高效液相色譜柱，柱長100 mm，內徑2.1mm，粒徑1.8μm；流動相A：體積分數為0.1%的甲酸水溶液，流動相B：體積分數為0.1%的甲酸乙腈溶液；流速0.45 mL/min；柱溫45 °C；進樣量2 μL；