[發明專利]小分子化合物組合及利用該小分子化合物組合誘導分化的細胞制備成骨細胞的方法有效
| 申請號： | 201610975762.2 | 申請日： | 2016-11-07 |
| 公開（公告）號： | CN108060121B | 公開（公告）日： | 2021-05-28 |
| 發明（設計）人： | 胡敏;李燕皎;王兆杰 | 申請（專利權）人： | 惠州市正多實業有限公司 |
| 主分類號： | C12N5/077 | 分類號： | C12N5/077;C12N5/071 |
| 代理公司： | 昆明今威專利商標代理有限公司 53115 | 代理人： | 賽曉剛 |
| 地址： | 516211 廣東省惠州*** | 國省代碼： | 廣東;44 |
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| 摘要： | |||
| 搜索關鍵詞： | 分子 化合物 組合 利用 誘導 分化 細胞 制備 方法 | ||
1.一種利用小分子化合物組合誘導分化的細胞制備成骨細胞的方法，其特征在于，所述分化的細胞與第一階段小分子化合物接觸誘導的時間為3～8天，第一階段接觸誘導后的細胞產物與第二階段小分子化合物接觸誘導的時間為5～18天，隨后更換為常規的成骨分化培養液或者市售商業化的成骨誘導液，培養12～30天后制備得到成骨細胞，所述分化的細胞為成纖維細胞；
所述第一階段小分子化合物采用Forskolin、Repsox、CHIR99021和VPA，第一階段小分子化合物用于上調分化的細胞Runt相關轉錄因子2/核心結合因子a1和堿性磷酸酶ALP表達；
所述第二階段小分子化合物采用下列任一項：
Forskolin+Repsox+CHIR99021+VPA+TTNPB+AM580+EPZ004777+Go6983；
Forskolin+Repsox+CHIR99021+VPA+TTNPB+AM580+EPZ004777+Go6983+L-Ascorbinacid 2-phosphate；
Forskolin+Repsox+CHIR99021+VPA+TTNPB+AM580+EPZ004777+Go6983+L-Ascorbinacid 2-phosphate+ SP600125；
Forskolin+Repsox+CHIR99021+VPA+TTNPB+AM580+EPZ004777+Go6983+L-Ascorbinacid 2-phosphate+ SP600125+5-Aza-2 '-deoxycytidine；
Forskolin+Repsox+CHIR99021+VPA+TTNPB+AM580+EPZ004777+Go6983+L-Ascorbinacid 2-phosphate+5-Aza-2 '-deoxycytidine；
Forskolin+Repsox+CHIR99021+VPA+TTNPB+AM580+EPZ004777+Go6983+SP600125+5-Aza-2 '-deoxycytidine；
Forskolin+Repsox+CHIR99021+VPA+TTNPB+EPZ004777+Go6983+Y-27632+L-Ascorbinacid 2-phosphate+5-Aza-2 '-deoxycytidine；
促進第一階段所得分化的細胞產物繼續重編程。
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