[發明專利]一種基于CdSe/ZnS量子點納米簇的電化學發光生物傳感器及其制法和應用

在審

• 申請號: 201610861890.4
• 申請日: 2016-09-29
• 公開（公告）號: CN106645107A
• 公開（公告）日: 2017-05-10
• 發明（設計）人: 接貴芬;路正坤
• 申請（專利權）人: 青島科技大學
• 主分類號: G01N21/76
• 分類號: G01N21/76;G01N27/38;C09K11/88;B82Y20/00;B82Y30/00;B82Y40/00
• 代理公司: 青島中天匯智知識產權代理有限公司37241
• 代理人: 郝團代

技術領域：

本發明涉及一種新型的基于CdSe/ZnS量子點納米簇的電化學發光生物傳感器的研制新方法，以及利用該電化學發光生物傳感器檢測癌細胞的分析方法。

背景技術：

電致化學發光(ECL)具有操作簡單，快速，靈敏度高，可控性好等諸多優良的性能特點，ECL生物傳感器作為一種新型的分析檢測裝置正逐漸應用于各種生物分析檢測。[Piper,D.J.E.；Barbante,G.J.；Brack,N.；Pigram,P.J.；Hogan,C.F.Langmuir 2011,27,474–480.]。最近，以量子點為發光材料的ECL生物傳感器和生物分析技術由于其顯著的ECL發光性能、良好的生物相容性以及本身的納米放大效應等諸優點而廣泛應用于分析科學領域。[Lei,J.；Ju,H.TrendsAnal.Chem.2011,30,1351–1359.]。基于量子點ECL的免疫分析測定[Lin,D.；Wu,J.；Yan,F.；Deng,S.；Ju,H.Anal.Chem.2011,83,5214–5221.]，適配體技術[Jie,G.F.；Yuan,J.X.；Zhang,J.Biosens.Bioelectron.2012,31,69–76.]，DNA檢測[Divsar,F.；Ju,H.Chem.Commun.2011,47,9879–9881.]以及細胞傳感技術等許多方法[Jie,G.F.；Wang,L.；Yuan,J.X.；Zhang,S.S.Anal.Chem.2011,83,3873–3880.]越來越多地應用于生物分子的高靈敏檢測。

癌癥是目前最難治療的疾病之一，嚴重威脅著人們的身心健康。因此對癌細胞靈敏準確的識別和檢測對于癌癥的診斷和治療相當重要。目前，檢測腫瘤細胞的方法有很多，比如流式細胞術[Raddatz,M.-S.L.；Dolf,A.；Endl,E.；Knolle,P.；Famulok,M.；Mayer,G.Angew.Chem.Int.Ed.2008,47,5190–5193.]，聚合酶鏈式反應[Zhang,X.；Yu,R.M.K.；Jones,P.D.；Lam,G.K.W.；Newsted,J.L.；Gracia,T.；Hecker,M.；Hilscherova,K.；Sanderson,J.T.；Wu,R.S.S.；Giesy,J.P.Environ.Sci.Technol.2005,392777–2785.]，微量測定技術[Xu,Y.；Phillips,J.A.；Yan,J.；Li,Q.；Fan,Z.H.；Tan,W.Anal.Chem.2009,81,7436–7442.]以及細胞濃縮技術[Phillips,J.A.；Xu,Y.；Xia,Z.；Fan,Z.H.；Tan,W.Anal.Chem.2009,81,1033–1039.]等。到目前為止，許多DNA信號放大的技術已經應用于生物分析，比如聚合酶鏈式反應[Wan,G.；EnLim,Q.；Too,H.P.RNA2010,16,1436–1445.]，滾環復制放大[Zhou,Y.；Huang,Q.；Gao,J.；Lu,J.；Shen,X.；Fan,C.Nucleic Acids Res.2010,38,e156.]，鏈置換放大[Qiu,L.P.；Wu,Z.S.；Shen,G.L.；Yu,R.Q.Anal.Chem.2011,83,3050–3057.]以及基于核酸外切酶和內切酶的放大技術[Zhang,H.；Li,F.；Dever,B.；Li,X.F.；Le,X.C.Chem.Rev.2013,113,2812–2841.]，然而這些方法均需要穩定的熱環境或者生物酶的參與。最近報道的雜交鏈式反應作為一種DNA自聚合的過程[Choi,H.M.T.；Chang,J.Y.；Trinh,L.A.；Padilla,J.E.；Fraser,S.E.；Pierce,N.A.Nat.Biotechnol.2010,28,1208–1212.]，在沒有生物酶參與的情況下實現了對生物分子的高選擇性和特異性檢測。所有無酶放大技術中，雜交鏈式反應受到研究者的廣泛青睞[Peng,Y.；Choi,H.M.T.；Calvert,C.R.；Pierce,N.A.Nature 2008,451,318-322.]，已經應用于核酸和蛋白質的分析檢測[Zhu,G.,Zheng,J.,Song,E.,Donovan,M.,Zhang,K.,Liu,C.,Tan,W.,Proc.Natl.Acad.Sci.U.S.A.2013,1107998–8003.]。然而，還鮮有報道將雜交鏈式反應放大技術與ECL結合，并應用于癌細胞的高靈敏檢測。