[發明專利]基于組織培養的花葉吳風草快速繁育方法

在審

• 申請號: 201610854285.4
• 申請日: 2016-09-27
• 公開（公告）號: CN107864854A
• 公開（公告）日: 2018-04-03
• 發明（設計）人: 陳建華;黃建榮;金夢怡;李霖;龐玉華
• 申請（專利權）人: 上海上房園藝有限公司;上海上房園林植物研究所有限公司
• 主分類號: A01H4/00
• 分類號: A01H4/00
• 代理公司: 上海科盛知識產權代理有限公司31225
• 代理人: 褚明偉

1.一種基于組織培養的花葉吳風草快速繁育方法，其特征在于，包括以下步驟：

(1)培養基的配制，包括組培各階段培養基的組分和含量：

1.1、芽誘導培養基：MS+BA 1-3mg/L+NAA 0.1-0.3mg/L；

1.2、不定芽增殖培養基：MS+6-BA 0.5-1.5mg/L+NAA 0.05-0.15mg/L；

1.3、壯苗培養基：MS+6-BA 0.1-0.3mg/L+NAA 0.01-0.03mg/L；

1.4、生根培養基：MS+NAA 0.05-0.15mg/L；

上述各種培養基的pH5.8，加入蔗糖30g/L，瓊脂6g/L，培養溫度為25±1℃，光照為1100-1300Lx；

(2)花葉吳風草的組織培養：

2.1、無菌材料的獲得

花葉吳風草在春季3-4月挖取地上部分的小芽，用自來水沖洗1h后于超凈工作臺上，用75％的乙醇浸泡30s，1‰升汞浸泡15min，無菌水沖洗5-6次，無菌濾紙吸干表面水份，取小芽基部切成1cm長，接種于芽誘導培養基上；

2.2、芽的分化和增殖

小芽接種于誘導培養基上30天后，小芽基部開始膨大，出現黃綠色突起,再培養25天可見明顯的愈傷組織，繼續培養30天，切下帶芽愈傷組織放入不定芽增殖培養基上培養；

2.3、不定芽壯苗培養

在不定芽增殖培養基上，誘導出的叢生芽每叢只有3-4株可以伸長，其余處于矮化狀態，分成小叢或單芽后，放入壯苗培養基，不定芽迅速伸長，20天后可以長到2-3cm；

2.4、生根培養

取1.5-2cm的小植株，轉接入生根培養基中誘導生根，20天后幼苗基部分化出許多白色的根原基，30天后可以長至1-2cm；

2.5、煉苗與移栽

生根培養28-32天后，根系長至1-2cm時，選擇根系發達生長健壯的無菌苗，室內開瓶煉苗3天，取出后洗凈根部瓊脂，在溫室中馴化煉苗40天后，即移栽室外，給予肥水管理，移栽成活率為90％以上。

2.根據權利要求1所述的一種基于組織培養的花葉吳風草快速繁育方法，其特征在于，所述的芽誘導培養基的組分和含量為：MS+BA 2mg/L+NAA 0.2mg/L。

3.根據權利要求1所述的一種基于組織培養的花葉吳風草快速繁育方法，其特征在于，所述的不定芽增殖培養基的組分和含量為：MS+6-BA 1mg/L+NAA 0.1mg/L。

4.根據權利要求1所述的一種基于組織培養的花葉吳風草快速繁育方法，其特征在于，所述的壯苗培養基的組分和含量為：MS+6-BA 0.2mg/L+NAA 0.02mg/L。

5.根據權利要求1所述的一種基于組織培養的花葉吳風草快速繁育方法，其特征在于，所述的生根培養基的組分和含量為：MS+NAA 0.1mg/L。