[發明專利]抗體調控的雙抗原特異性T細胞及其制備方法和應用

有效

• 申請號: 201610824893.0
• 申請日: 2016-09-14
• 公開（公告）號: CN106635998B
• 公開（公告）日: 2018-01-09
• 發明（設計）人: 不公告發明人
• 申請（專利權）人: 深圳市默賽爾生物醫學科技發展有限公司
• 主分類號: C12N5/10
• 分類號: C12N5/10;C12N15/867;A61K39/395;A61K47/46;A61P35/00
• 代理公司: 深圳中一專利商標事務所44237
• 代理人: 左光明

技術領域

本發明屬于生物制藥技術領域，具體涉及一種雙抗原特異性T細胞及其產生方法及包含雙抗原特異性T細胞的靶向三陰性乳腺癌細胞的藥物制劑。

背景技術

T淋巴細胞是參與腫瘤細胞免疫治療的主要效應細胞，T細胞的激活依靠“雙信號”細致地調控。第一信號是T淋巴細胞表面的一種特異性受體TCR(T cell recepor)分子與腫瘤細胞表面主要組織相容性復合體(MHC)提呈的抗原肽的結合，即T細胞對抗原的識別；第二信號是協同刺激分子與T細胞表面的相應受體或配體相互作用介導的信號。CD28/B7是重要的正性共刺激分子，其主要作用是促進IL-2合成。如T細胞缺乏共刺激信號，會導致T細胞無能。

三陰性乳腺癌(Triple Negative Breast Cancer，TNBC)是一種高度侵襲性的腫瘤，其細胞表面不表達雌激素受體(Estrogen Receptor，ER)，孕激素受體(Progestrone Receptor，PR)和表皮生長因子受體(Epidermal Growth Factor Receptor，EGFR)。由于缺乏有效的分子靶點，臨床上缺乏針對TNBC的有效治療手段，因此TNBC的總體生存率低于其它類型的乳腺癌患者，且更易發生淋巴結轉移。

間皮素(Mesothelin，簡稱Meso)是一種分子量為40kDa的細胞表面糖蛋白，高表達于多種惡性實體腫瘤組織中，已有研究表明Meso在TNBC細胞表面有較高的表達水平，但同時Meso在正常胸膜、心包和腹膜的間皮細胞中也有少量表達。另外，最新研究顯示，在TNBC細胞表面還檢測到高表達的低氧誘導因子-1α(hypoxia inducible factor-1α，HIF-1α)。因此，如何能夠有效對TNBC進行識別與殺傷，并避免對正常細胞誤殺是需要克服的問題。

發明內容

本發明實施例的目的在于克服現有技術的上述不足，提供一種雙抗原特異性T細胞及其制備方法，以解決當前不能有效對TNBC進行識別與殺傷，且容易造成對正常細胞誤殺的技術問題。

本發明實施例的另一目的在于提供一種靶向三陰性乳腺癌細胞的藥物制劑，以解決現有生物治療三陰性乳腺癌存在療效不佳，以及對正常細胞造成損傷的技術問題。

為了實現上述發明目的，作為本發明的一方面，提供了一種雙抗原特異性T細胞。所述雙抗原特異性T細胞包括間皮素抗原特異性T細胞受體基因和在HIF-1α抗體介導下特異性識別HIF-1α抗原的抗體Fc段特異性T細胞受體基因。

相應地，本發明實施例提供了一種雙抗原特異性T細胞的制備方法。所述制備方法包括如下步驟：

將T細胞被第一慢病毒和第二慢病毒同時感染；所述第一慢病毒含有間皮素抗原特異性T細胞受體基因，所述第二慢病毒含有所述HIF-1α抗原特異性T細胞受體基因。

作為本發明的另一方面，提供了一種靶向三陰性乳腺癌細胞的藥物制劑。所述藥物制劑包括本發明雙抗原特異性T細胞或者由本發明制備方法制備的雙抗原特異性T細胞，還包括HIF-1α抗體。

與現有技術相比，本發明雙抗原特異性T細胞由于含有間皮素抗原特異性T細胞受體基因和在HIF-1α抗體介導下特異性識別HIF-1α抗原的抗體Fc段特異性T細胞受體基因，因此，本發明雙抗原特異性T細胞具有兩個特異性結合域，可靶向Meso和HIF-1α抗體介導下特異性識別HIF-1α抗原的雙特異性，保證了本發明實施例雙抗原特異性T細胞對TNBC細胞的特異性識別與殺傷，同時避免了機體正常細胞的誤殺損傷。

本發明雙抗原特異性T細胞制備方法通過含有間皮素抗原特異性T細胞受體基因的第一慢病毒和含有抗體Fc段特異性T細胞受體基因的第二慢病毒對T細胞感染，使得感染得到的轉基因T細胞具有靶向Meso和抗體Fc段的兩個特異性結合域，保證了本發明雙抗原特異性T細胞對TNBC細胞的特異性識別與殺傷，同時避免了機體正常細胞的誤殺損傷，而且本發明制備方法對T細胞感染率高。