[發(fā)明專利]視黃醇結(jié)合蛋白檢測(cè)試劑的包被方法有效
| 申請(qǐng)?zhí)枺?/td> | 201610788758.5 | 申請(qǐng)日: | 2016-08-31 |
| 公開(公告)號(hào): | CN106383234B | 公開(公告)日: | 2017-11-24 |
| 發(fā)明(設(shè)計(jì))人: | 陳瑞;李基;胡振華 | 申請(qǐng)(專利權(quán))人: | 上海科華生物工程股份有限公司 |
| 主分類號(hào): | G01N33/68 | 分類號(hào): | G01N33/68;G01N33/543 |
| 代理公司: | 上海晨皓知識(shí)產(chǎn)權(quán)代理事務(wù)所(普通合伙)31260 | 代理人: | 成麗杰 |
| 地址: | 200233 上*** | 國省代碼: | 上海;31 |
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| 摘要: | |||
| 搜索關(guān)鍵詞: | 視黃醇 結(jié)合 蛋白 檢測(cè) 試劑 包被 方法 | ||
1.一種視黃醇結(jié)合蛋白檢測(cè)試劑的包被方法,其特征在于,包含以下步驟:
向納米膠乳微球加入交聯(lián)緩沖液進(jìn)行稀釋,加入交聯(lián)劑后進(jìn)行攪拌;
在所述攪拌的過程中加入視黃醇結(jié)合蛋白抗體、十二烷基硫酸鈉-聚乙烯吡咯烷酮溶液進(jìn)行交聯(lián),交聯(lián)后進(jìn)行離心、超聲分散清洗,再離心即得離心沉淀物;
向所述離心沉淀物中加入視黃醇結(jié)合蛋白檢測(cè)試劑R2的稀釋液,超聲分散后,即得包被的視黃醇結(jié)合蛋白檢測(cè)試劑R2。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的包被方法,其特征在于,所述交聯(lián)劑為碳二亞胺鹽酸鹽或者N-羥基硫代琥珀酰亞胺。
3.根據(jù)權(quán)利要求2所述的包被方法,其特征在于,所述碳二亞胺鹽酸鹽的濃度為5~15mg/ml;所述N-羥基硫代琥珀酰亞胺的濃度為50~150mg/ml。
4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的包被方法,其特征在于,所述交聯(lián)緩沖液為2-(N-嗎啡啉)乙磺酸緩沖液;所述交聯(lián)緩沖液的濃度為20~70mM。
5.根據(jù)權(quán)利要求1所述的包被方法,其特征在于,所述十二烷基硫酸鈉-聚乙烯吡咯烷酮溶液的質(zhì)量百分?jǐn)?shù)為1~3%。
6.根據(jù)權(quán)利要求1所述的包被方法,其特征在于,所述視黃醇結(jié)合蛋白檢測(cè)試劑R2稀釋液包含:濃度為50~100mM的磷酸氫鈉溶液、濃度為50~100mM的磷酸氫二鈉溶液以及濃度為10~30g/mL的氯化鈉溶液。
7.根據(jù)權(quán)利要求6所述的包被方法,其特征在于,所述視黃醇結(jié)合蛋白檢測(cè)試劑R2稀釋液還包含:聚氧乙烯失水山梨醇脂肪酸酯溶液以及小牛白蛋白溶液。
8.根據(jù)權(quán)利要求7所述的包被方法,其特征在于,所述聚氧乙烯失水山梨醇脂肪酸酯溶液的體積百分?jǐn)?shù)為:0.2~0.5%,所述小牛白蛋白溶液的質(zhì)量百分?jǐn)?shù)為:1~1.5%。
9.根據(jù)權(quán)利要求1所述的包被方法,其特征在于,所述視黃醇結(jié)合蛋白抗體的濃度為10~20mg/mL。
10.根據(jù)權(quán)利要求1至9任一項(xiàng)所述的包被方法,其特征在于,所述納米膠乳微球的粒徑為50~150nm。
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