[發(fā)明專利]RPS15A基因的用途及其相關(guān)藥物

在審

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 201610771930.6
• 申請(qǐng)日: 2016-08-30
• 公開（公告）號(hào): CN107794299A
• 公開（公告）日: 2018-03-13
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 譚暢;陳琳;王慶亮;沈浩;瞿紅花;曹躍瓊
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 上海吉?jiǎng)P基因化學(xué)技術(shù)有限公司
• 主分類號(hào): C12Q1/6886
• 分類號(hào): C12Q1/6886;C12N15/113;C12N15/867;C12N7/01;A61K31/713;A61K48/00;A61P35/00
• 代理公司: 上海光華專利事務(wù)所(普通合伙)31219
• 代理人: 李艷,許亦琳

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明涉及生物技術(shù)領(lǐng)域，更具體地涉及RPS15A基因的用途及其相關(guān)藥物。

背景技術(shù)

RNA干擾(RNA interference,RNAi)即用核苷酸組成的短的雙鏈RNA(dsRNA)進(jìn)行轉(zhuǎn)錄后基因沉默。它可高效、特異地阻斷體內(nèi)特定基因的表達(dá)，導(dǎo)致其降解，從而引起生物體內(nèi)特異基因的沉默，使細(xì)胞表現(xiàn)出某種基因表型的缺失，是近年來(lái)新興的一種常用的研究基因功能、尋找疾病治療方法的實(shí)驗(yàn)室技術(shù)。研究表明，長(zhǎng)度為21-23 nt的雙鏈RNA能夠在轉(zhuǎn)錄和轉(zhuǎn)錄后水平特異性的引起RNAi(Tuschl T,Zamore PD,Sharp PA,Bartel DP.RNAi:double-stranded RNA directs the ATP-dependent cleavage of mRNA at 21 to 23 nucleotide intervals.Cell 2000；101:25-33.)。腫瘤患者雖經(jīng)化療、放療和綜合治療，但五年生存率仍很低，如能對(duì)腫瘤發(fā)病和進(jìn)展有關(guān)的基因進(jìn)行干預(yù)，將能為腫瘤的治療開辟新途徑。近年來(lái)，RNAi已成為腫瘤的基因治療的有效策略。利用RNAi技術(shù)可以抑制原癌基因、突變的抑癌基因、細(xì)胞周期相關(guān)基因、抗凋亡相關(guān)基因等的表達(dá)來(lái)抑制腫瘤進(jìn)程(Uprichard,Susan L.The therapeutic potential of RNA interference.FEBS Letters 2005；579:5996-6007.)。

RPS15A位于(16號(hào)染色體短臂的1區(qū)3帶)16p13，屬于RPS8家族。RPS15A在翻譯的早期可促進(jìn)mRNA帽結(jié)合蛋白與核糖體小亞基結(jié)合。Shend等用mRNA展示技術(shù)掃描人類鈣調(diào)素結(jié)合蛋白程序庫(kù)時(shí)發(fā)現(xiàn)RPS15A可與鈣調(diào)素(CaM)結(jié)合，從而啟動(dòng)其核糖體裝配和翻譯進(jìn)程。

但RPS15A在骨肉瘤中的作用未見報(bào)道。

發(fā)明內(nèi)容

本發(fā)明的目的在于公開與人RPS15A基因相關(guān)的治療方法及藥物，以RNA干擾(RNAi)為手段研究RPS15A基因在腫瘤細(xì)胞的存活和凋亡過程中的作用。

本發(fā)明第一方面，以RNA干擾為手段，研究了RPS15A基因在腫瘤發(fā)生和發(fā)展中的作用，公開了一種抑制或降低腫瘤細(xì)胞生長(zhǎng)、增殖、分化和/或存活的方法，該方法包括：向腫瘤細(xì)胞施用一種能夠特異性抑制RPS15A基因的轉(zhuǎn)錄或翻譯，或能夠特異性抑制RPS15A蛋白的表達(dá)或活性的分子，以此來(lái)抑制腫瘤細(xì)胞的生長(zhǎng)、增殖、分化和/或存活。

所述腫瘤細(xì)胞選自其生長(zhǎng)與RPS15A蛋白的表達(dá)或活性相關(guān)的腫瘤細(xì)胞。較優(yōu)的，所述腫瘤細(xì)胞選自骨肉瘤。

所述抑制或降低腫瘤細(xì)胞生長(zhǎng)、增殖、分化和/或存活的方法中，所述分子的施用量為足夠降低RPS15A基因的轉(zhuǎn)錄或翻譯，或者足夠降低RPS15A蛋白的表達(dá)或活性的劑量。進(jìn)一步的，所述RPS15A基因的表達(dá)至少被降低50％、80％、90％、95％或99％。

所述分子可選自但不限于：核酸分子、碳水化合物、脂類、小分子化學(xué)藥、抗體藥、多肽、蛋白或干擾慢病毒。

所述核酸包括但不限于：反義寡核苷酸、雙鏈RNA(dsRNA)、核酶、核糖核酸內(nèi)切酶III制備的小干擾RNA(esiRNA)或者短發(fā)夾RNA(shRNA)。

所述雙鏈RNA、核酶、esiRNA或者shRNA含有RPS15A基因的啟動(dòng)子序列或RPS15A基因的信息序列。

進(jìn)一步的，所述雙鏈RNA為小干擾RNA(siRNA)。所述小干擾RNA包含第一鏈和第二鏈，所述第一鏈和所述第二鏈互補(bǔ)共同形成RNA二聚體，并且所述第一鏈的序列與RPS15A基因中15-27個(gè)連續(xù)的核苷酸序列基本相同。所述小分子干擾RNA能特異性結(jié)合靶序列所編碼的mRNA片段，并特異性沉默人RPS15A基因的表達(dá)。

進(jìn)一步的，所述小干擾RNA的第一鏈序列與RPS15A基因中的靶序列基本相同。較優(yōu)的，所述RPS15A基因中的靶序列含有SEQ ID NO:1所示序列。

所述RPS15A基因中的靶序列即為所述小分子干擾RNA特異性沉默RPS15A基因表達(dá)時(shí)，與所述的小分子干擾RNA互補(bǔ)結(jié)合的mRNA片段所對(duì)應(yīng)的RPS15A基因中的片段。

較佳的，所述RPS15A基因來(lái)源于人。

本發(fā)明第一方面還公開了一種分離的人RPS15A基因在制備或篩選腫瘤治療藥物中的用途。

進(jìn)一步的，所述腫瘤選自骨肉瘤。