[發明專利]一種基于膜的生物樣品化學發光檢測方法和相關檢測試劑盒

在審

• 申請號: 201610755459.1
• 申請日: 2016-08-26
• 公開（公告）號: CN107782721A
• 公開（公告）日: 2018-03-09
• 發明（設計）人: 韋彥余;王軍峰
• 申請（專利權）人: 韋彥余
• 主分類號: G01N21/76
• 分類號: G01N21/76;G01N33/576;G01N33/68;G01N33/76
• 代理公司: 上海唯源專利代理有限公司31229
• 代理人: 曾耀先

1.一種基于膜的生物樣品化學發光檢測方法，其特征在于，包括以下步驟：

(1)將第一檢測物包被在膜上；

(2)使待檢測生物樣品與所述膜接觸，所述第一檢測物與所述待檢測生物樣品中的被檢測物結合形成第一復合體；

(3)使第二檢測物與所述膜接觸，所述第二檢測物標記有化學發光劑或底物為化學發光底物的酶，所述第二檢測物與所述第一復合體中的所述被檢測物結合形成第二復合體；

(4)加入啟動發光劑，如果所述第二檢測物標記有所述酶，則還需加入所述化學發光底物，所述啟動發光劑用于使所述化學發光劑或所述化學發光底物發光，然后進行化學發光測量。

2.如權利要求1所述的基于膜的生物樣品化學發光檢測方法，其特征在于，所述膜是聚偏氟乙烯膜、硝酸纖維素膜、尼龍膜或DEAE纖維素膜。

3.如權利要求1所述的基于膜的生物樣品化學發光檢測方法，其特征在于，采用親和素將所述膜親和素化，采用生物素標記所述第一檢測物，所述第一檢測物通過所述生物素和所述親和素反應包被在所述膜上。

4.如權利要求1所述的基于膜的生物樣品化學發光檢測方法，其特征在于，所述被檢測物是生物標志物，所述第一檢測物是用于檢測所述生物標志物的第一抗原、第一抗體或第一核酸，所述第二檢測物是用于檢測所述生物標志物的第二抗原、第二抗體或第二核酸。

5.如權利要求4所述的基于膜的生物樣品化學發光檢測方法，其特征在于，所述生物標志物是C反應蛋白，所述第一檢測物是第一C反應蛋白抗體，所述第二檢測物是第二C反應蛋白抗體；所述生物標志物是人絨毛膜促性腺激素，所述第一檢測物是第一人絨毛膜促性腺激素抗體，所述第二檢測物是第二人絨毛膜促性腺激素抗體；或者，所述生物標志物是乙肝核心抗體，所述第一檢測物和所述第二檢測物均為乙肝核心抗原。

6.如權利要求1所述的基于膜的生物樣品化學發光檢測方法，其特征在于，所述化學發光劑是吖啶酯、吖啶酯衍生物、魯米諾、魯米諾衍生物或三聯吡啶釕，所述啟動發光劑是氫氧化鈉和過氧化氫。

7.如權利要求1所述的基于膜的生物樣品化學發光檢測方法，其特征在于，所述酶是辣根過氧化物酶，所述化學發光底物是魯米諾或魯米諾衍生物，所述啟動發光劑是過氧化氫；或者，所述酶是堿性磷酸酶，所述化學發光底物是金剛烷～1,2～二氧乙烷衍生物，所述啟動發光劑是過氧化氫。

8.如權利要求1所述的基于膜的生物樣品化學發光檢測方法，其特征在于，所述的基于膜的生物樣品化學發光檢測方法還包括以下步驟：采用標準品替換所述待檢測生物樣品進行所述步驟(1)至所述步驟(4)，所述標準品中含有定量的所述被檢測物，從而繪制所述被檢測物的標準曲線，以定量所述待檢測生物樣品中的所述被檢測物的含量。

9.一種基于膜的生物樣品化學發光檢測試劑盒，其特征在于，包括膜、第一檢測物、第二檢測物和啟動發光劑，所述第一檢測物包被在所述膜上，所述第一檢測物用于與待檢測生物樣品中的被檢測物結合形成第一復合體，所述第二檢測物標記有化學發光劑或底物為化學發光底物的酶，所述第二檢測物用于與所述第一復合體中的所述被檢測物結合形成第二復合體，如果所述第二檢測物標記有所述酶，則所述的基于膜的生物樣品化學發光檢測試劑盒還包括所述化學發光底物，所述啟動發光劑用于使所述化學發光劑或所述化學發光底物發光。

10.如權利要求9所述的基于膜的生物樣品化學發光檢測試劑盒，其特征在于，所述的基于膜的生物樣品化學發光檢測試劑盒還包括標準品，所述標準品中含有定量的所述被檢測物。