[發明專利]一種恒溫擴增反應試劑在審
| 申請號： | 201610598257.0 | 申請日： | 2016-07-27 |
| 公開（公告）號： | CN106636061A | 公開（公告）日： | 2017-05-10 |
| 發明（設計）人： | 葉邦策;尹斌成;史楊 | 申請（專利權）人： | 華東理工大學 |
| 主分類號： | C12N15/10 | 分類號： | C12N15/10 |
| 代理公司： | 上海新天專利代理有限公司31213 | 代理人： | 龔敏 |
| 地址： | 200237 *** | 國省代碼： | 上海;31 |
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| 摘要： | |||
| 搜索關鍵詞： | 一種 恒溫 擴增 反應 試劑 | ||
【權利要求書】：
1.一種恒溫擴增反應試劑，溶劑為水，其組成如下：
所述AMV反轉錄酶是RNA為模板合成DNA，或DNA為模板合成DNA；
所述RNase H酶能消化RNA-DNA雜交雙鏈中的RNA鏈。
2.根據權利要求1所述的恒溫擴增反應試劑，其特征在于：Tris–HCl的pH為8.5。
3.一種核酸恒溫擴增方法，包括將引物、模板與恒溫擴增反應試劑混合，完成核酸恒溫擴增，其中，所述恒溫擴增反應試劑為權利要求1所述的恒溫擴增反應試劑。
4.根據權利要求3所述的一種核酸恒溫擴增方法，其特征在于，擴增反應結束后用凝膠電泳對反應產物進行檢測。
5.根據權利要求3所述的核酸恒溫擴增方法，其特征在于，恒溫擴增的溫度為37 - 41°C。
6.一種連接反應試劑，溶劑為水，其組成如下：
T7 RNA聚合酶，適量。
7.根據權利要求6所述的連接反應試劑，其特征在于：所述Tris–HCl的pH為7.9。
8.一種長雙鏈模板的剪切方法，包括根據序列選擇限制性內切酶對模板剪切，其特征在于：不同的限制性內切酶采用不用的緩沖液體系，剪切后將體系的酶滅活，完成剪切反應。
9.一種環狀雙鏈DNA模板的生成方法，包括將T7序列與剪切后的模板序列混合，恒溫完成反應后，將連接反應體系的酶滅活，其中，剪切反應試劑如權利要求6所述。
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