[發(fā)明專(zhuān)利]新型自組裝膠原蛋白及制備方法有效
| 申請(qǐng)?zhí)枺?/td> | 201610574213.4 | 申請(qǐng)日: | 2016-07-19 |
| 公開(kāi)(公告)號(hào): | CN107630059B | 公開(kāi)(公告)日: | 2021-06-15 |
| 發(fā)明(設(shè)計(jì))人: | 裴雪濤;南雪;游子娟;單紫筠;魏紅;姚海雷;賈茜媛;龍冬瑩 | 申請(qǐng)(專(zhuān)利權(quán))人: | 華南生物醫(yī)藥研究院 |
| 主分類(lèi)號(hào): | C12P21/06 | 分類(lèi)號(hào): | C12P21/06;C07K1/34 |
| 代理公司: | 北京清亦華知識(shí)產(chǎn)權(quán)代理事務(wù)所(普通合伙) 11201 | 代理人: | 李志東 |
| 地址: | 510200 廣東省*** | 國(guó)省代碼: | 廣東;44 |
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| 摘要: | |||
| 搜索關(guān)鍵詞: | 新型 組裝 膠原 蛋白 制備 方法 | ||
1.一種制備自組裝膠原蛋白的方法,其特征在于,包括:
(1)利用胰蛋白酶和堿性蛋白酶對(duì)動(dòng)物源膠原蛋白進(jìn)行酶解處理,以便獲得含有小分子肽的酶解產(chǎn)物;
(2)對(duì)所述酶解產(chǎn)物進(jìn)行超濾處理,以便獲得膠原蛋白多肽溶液;
(3)將所述膠原蛋白多肽溶液與醋酸混合后進(jìn)行透析處理以便獲得所述自組裝膠原蛋白,其中,所述透析處理采用磷酸鹽緩沖液作為透析外液;
其中,所述酶解處理包括:
利用胰蛋白酶進(jìn)行第一水解處理2~6小時(shí);
利用堿性蛋白酶對(duì)所述第一水解處理的產(chǎn)物進(jìn)行第二水解處理2~6小時(shí);以及
對(duì)所述第二水解處理的產(chǎn)物進(jìn)行離心,并收集上清液,所述上清液構(gòu)成所述酶解處理產(chǎn)物。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法,其特征在于,所述動(dòng)物源膠原蛋白為畜類(lèi)膠原蛋白或魚(yú)膠原蛋白。
3.根據(jù)權(quán)利要求2所述的方法,其特征在于,所述動(dòng)物源膠原蛋白為牛膠原蛋白、豬膠原蛋白或馬膠原蛋白。
4.根據(jù)權(quán)利要求3所述的方法,其特征在于,在所述第一水解處理和所述第二水解處理后均包括沸水浴滅酶活的步驟。
5.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法,其特征在于,所述酶解產(chǎn)物用截留分子量為1 ~5 kDa的超濾膜進(jìn)行超濾。
6.根據(jù)權(quán)利要求5所述的方法,其特征在于,所述酶解產(chǎn)物用截留分子量為1kDa的超濾膜進(jìn)行超濾。
7.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法,其特征在于,在步驟(-3 )中,將所述膠原多肽溶液與0.05~1.0mol/L的醋酸混合,其中,所述膠原多肽的終濃度為0.5~5 mg/mL。
8.根據(jù)權(quán)利要求7所述的方法,其特征在于,將所述膠原蛋白多肽溶液與0.5 mol/L的醋酸混合,其中,所述膠原多肽的終濃度為3mg/mL。
9.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法,其特征在于,所述磷酸鹽緩沖溶液的濃度為50 mM,pH為6.5~8.5。
10.根據(jù)權(quán)利要求9所述的方法,其特征在于,所述磷酸鹽緩沖溶液的pH值為7.0。
11.一種自組裝膠原蛋白,所述自組裝膠原蛋白是通過(guò)權(quán)利要求1-10任意一項(xiàng)所述方法制備的。
12.權(quán)利要求11所述的自組裝膠原蛋白在制備食品、保健品、美容護(hù)膚品或者藥物中的用途。
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