[發明專利]一種平菇菌種鑒別的方法及專用DNA條形碼片段有效

申請號：	201610554693.8	申請日：	2016-07-14
公開（公告）號：	CN105950776B	公開（公告）日：	2018-02-06
發明（設計）人：	趙鵬;紀森鵬;周軍輝;高興喜	申請（專利權）人：	魯東大學
主分類號：	C12Q1/6895	分類號：	C12Q1/6895;C12Q1/04;C12N15/11
代理公司：	北京紀凱知識產權代理有限公司11245	代理人：	關暢,白艷
地址：	264025 山東***	國省代碼：	山東;37
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摘要：
搜索關鍵詞：	一種菌種鑒別方法專用 dna 條形碼片段
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【權利要求書】：

1.一種專用DNA條形碼在鑒別或輔助鑒別平菇（Pleurotus cornucopiae）菌種中的應用。

所述專用DNA條形碼為序列3第21-375位核苷酸所示的DNA片段。

2.檢測平菇（Pleurotus cornucopiae）菌種基因組中是否含有權利要求1中所述專用DNA條形碼的物質在鑒別平菇（Pleurotus cornucopiae）菌種中的應用。

3.根據權利要求2所述的應用，其特征在于:所述物質為如下1）或2）：

1）用于擴增所述專用DNA條形碼的引物對；

2）含有所述引物對的PCR試劑或試劑盒。

4.根據權利要求3所述的應用，其特征在于:所述引物對由引物1和引物2組成；所述引物1序列表中序列1所示的單鏈DNA分子；所述引物2為序列表中序列2所示的單鏈DNA分子；

所述PCR試劑中，所述引物1和所述引物2的摩爾比為1:1；所述引物1和所述引物2的濃度均為10 μmol/L。

5.一種鑒別或輔助鑒別平菇（Pleurotus cornucopiae）菌種的方法，包括如下步驟：檢測待測樣品中是否含有權利要求1中所述專用DNA條形碼；如果含有，則待測樣品為或候選為平菇（Pleurotus cornucopiae）菌種；如果不含有，則待測樣品不為或候選不為平菇（Pleurotus cornucopiae）菌種。

6.根據權利要求5所述的方法，其特征在于：

所述檢測待測樣品中是否含有權利要求1中所述專用DNA條形碼的方法包括如下步驟：

1）用序列表中序列1所示的單鏈DNA分子和序列表中序列2所示的單鏈DNA分子組成的引物對對待測樣品進行PCR擴增，得到PCR擴增產物；

2）測序所述PCR擴增產物，將所述PCR擴增產物的序列與所述DNA片段進行比對，若同源性大于99%，則待測樣品中含有所述DNA片段，若同源性小于等于99%，則待測樣品中不含有所述DNA片段。

7.根據權利要求5或6所述的方法，其特征在于：

所述PCR擴增的模板為待測樣品的基因組DNA。

8.檢測平菇菌種基因組中是否含有權利要求1中所述專用DNA條形碼的物質，其為如下1）或2）：

1）用于擴增所述專用DNA條形碼的引物對；

2）含有所述引物對的PCR試劑或試劑盒。

9.根據權利要求8所述的物質，其特征在于：

所述引物對由引物1和引物2組成；所述引物1序列表中序列1所示的單鏈DNA分子；所述引物2為序列表中序列2所示的單鏈DNA分子；

所述PCR試劑中，所述引物1和所述引物2的摩爾比為1:1；所述引物1和所述引物2的濃度均為10 μmol/L。