[發明專利]一種富鉬釀酒酵母及其制備方法

有效

• 申請號: 201610429223.9
• 申請日: 2016-06-16
• 公開（公告）號: CN105861350B
• 公開（公告）日: 2017-06-16
• 發明（設計）人: 孫學成;胡承孝;譚啟玲;徐守俊
• 申請（專利權）人: 華中農業大學
• 主分類號: C12N1/19
• 分類號: C12N1/19;C12N15/81;A61K36/064;A61P35/00;A61P9/00;A61P1/16;C12R1/865
• 代理公司: 武漢科皓知識產權代理事務所(特殊普通合伙)42222
• 代理人: 常海濤

技術領域

本發明涉及人體健康和發酵工程領域，具體涉及一種富鉬釀酒酵母及其制備方法。

背景技術

鉬是動物、微生物及人體所必需的微量營養元素之一，是固氮酶、硝酸還原酶、黃嘌呤氧化酶、醛氧化酶、亞硫酸氧化酶等多種酶的重要組成成分。鉬參與并影響機體內的多種代謝過程；鉬能抑制乳腺癌的生長，控制食道癌及其它癌癥的死亡率；鉬能保護心肌，預防心腦血管疾病和肝臟疾病；同時鉬對克山病、齲齒、小細胞低色素性貧血以及區域性脫發等地方病有很好的防治作用。鉬能增加機體抵抗病菌的能力，提高機體免疫能力；對動物的生長有明顯的促進作用。

酵母可通過吸收轉化，將培養基中所含微量元素富集于自身細胞組織中，將無機微量元素改變成毒性低的有機形態，提高生物利用率和安全性；同時，酵母本身的生物活性物質對生物體也有保健作用，是富集微量元素的有效載體之一。成人每日膳食中微量元素鉬需求量大約是0.1mg，因此富鉬酵母作為機體鉬源的補充，尤其是作為預防和治療癌癥、心腦血管疾病和肝臟疾病藥物的重要功效成分已引起人們極大重視。

目前富營養元素酵母品種選育所采用的方法主要包括紫外線、微波以及化學試劑誘變等獲得具有富營養元素較高的突變體酵母。以上育種方法存在一定的盲目性和隨機性，過程較為繁瑣。例如，紫外線誘變雖然操作比較簡單，但是操作不當會對人體產生傷害，并且此方法還需要進行大量的無目的性的篩選鑒定工作。

綜上所述，發明出一種可以快速準確地提高酵母鉬含量的方法是非常必要的，并通過這種方法進行制備其他以酵母為載體富集多種微量元素酵母新品種也是具有十分重要的意義。

發明內容

本發明的目的在于提供一種富鉬釀酒酵母，其對鉬的吸收富集能力強，能夠提高釀酒酵母相關產品的鉬含量，有效安全的補充人們所需要的必須微量元素鉬。本發明的目的還在于提供所述富鉬釀酒酵母的制備方法，該方法準確、生態安全、簡潔實用、費用低廉、適用性廣、可操作性強。

為了實現上述的目的，本發明采用以下技術方案：

一種富鉬釀酒酵母，為能組成型表達Glym08g22300基因的釀酒酵母，所述的Glym08g22300基因的核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示。

優選的，所述的富鉬釀酒酵母為轉化可組成型表達Glym08g22300基因的重組載體的釀酒酵母INVSC1；所述的重組載體以pAG306GPD-ccdB作為骨架載體。

所述的富鉬釀酒酵母的制備方法，包括如下步驟：將Glym08g22300基因連接到酵母組成型表達載體上構建重組表達載體，再將重組表達載體轉入釀酒酵母中得到富鉬釀酒酵母。

所述的富鉬釀酒酵母富鉬能力強，可用于制備預防和/或治療癌癥、心腦血管疾病和/或肝臟疾病的藥物。

一種富鉬釀酒酵母的篩選方法，包括如下步驟：

（1）通過blast得到鉬轉運子同源基因；

（2）將同源基因連接到酵母組成型表達載體上構建重組表達載體；

（3）將重組表達載體轉入釀酒酵母中；所得轉化子在含鉬培養基中培養后收集酵母細胞，測定鉬含量。

酵母本身具有將培養基中營養元素其富集于自身細胞組織中的功能，本發明利用轉基因技術把具有鉬吸收功能的目的基因轉入酵母中，通過測定酵母鉬吸收量，獲得一種可具有較高鉬富集能力的釀酒酵母。本發明與現有技術相比，具有以下優點和積極效果：

（1）本發明篩選周期短，可以在較快時間內獲得具有較高鉬富集能力的突變體菌株；

（2）本發明生態安全，不需要物理、化學等方法進行誘變處理；

（3）本發明所獲得的富鉬酵母鉬富集能力較高，可以有效的滿足生物體所需要的鉬營養。

因此，本發明具有良好的經濟效益和社會效益。

附圖說明

圖1是轉化含不同目的基因的表達載體的酵母中鉬含量的柱狀統計圖。

具體實施方式

下面結合實施例對本發明作進一步詳細的描述，但本發明的實施方式不限于此。若未特別指明，實施例中所用的技術手段為本領域技術人員所熟知的常規手段。

實施例1

1、候選基因的確定及引物的設計