[發明專利]TNFR1/MAP4K4/ARP3對裸鼠膠質瘤生長影響的腦內模型構建方法有效
| 申請號: | 201610398151.6 | 申請日: | 2016-06-07 |
| 公開(公告)號: | CN105879017B | 公開(公告)日: | 2017-08-15 |
| 發明(設計)人: | 藺玉昌;張敬寧;張燕 | 申請(專利權)人: | 無錫市第二人民醫院 |
| 主分類號: | A61K38/45 | 分類號: | A61K38/45;A61K38/17;A61K38/00 |
| 代理公司: | 深圳市科吉華烽知識產權事務所(普通合伙)44248 | 代理人: | 胡吉科 |
| 地址: | 214000 江蘇省無*** | 國省代碼: | 江蘇;32 |
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| 摘要: | |||
| 搜索關鍵詞: | tnfr1 map4k4 arp3 膠質 生長 影響 模型 構建 方法 | ||
1.TNFR1/MAP4K4/ARP3對裸鼠膠質瘤生長影響的腦內模型構建方法,其特征為包括以下步驟:步驟1,分別構建TNFR1、MAP4K4與ARP3過表達、小干擾的穩定細胞株,以1×108密度在腦立體定位儀下注射至裸鼠皮質內,構建裸鼠膠質瘤腦內模型;
步驟2 ,4周后收集腦組織,檢測腫瘤形成的大小、重量情況,并比較其與裸鼠生存率的關系,HE染色檢測腫瘤侵襲情況;
步驟3,獲取裸鼠腫瘤組織Western Blot及免疫組化檢測TNFR1、MAP4K4與ARP3的表達情況;
步驟4,組織消化,原代細胞培養,分析并驗證TNFR1/MAP4K4/ARP3三聚體對裸鼠原代膠質瘤細胞肌動蛋白聚合、細胞偽足形成及細胞遷移、侵襲能力的影響。
2.如權利要求1所述TNFR1/MAP4K4/ARP3對裸鼠膠質瘤生長影響的腦內模型構建方法,其特征為在步驟1中,分別構建TNFR1過表達、小干擾及不與MAP4K4相互作用的穩定細胞株;
在步驟3中,獲取裸鼠腫瘤組織Western Blot及免疫組化檢測TNFR1及MAP4K4的表達情況;
在步驟4中,驗證并分析TNFR1與MAP4K4的相互作用對裸鼠原代膠質瘤細胞遷移、侵襲能力的影響。
3.如權利要求1所述TNFR1/MAP4K4/ARP3對裸鼠膠質瘤生長影響的腦內模型構建方法,其特征為在步驟1,分別構建MAP4K4過表達、小干擾及不與ARP3相互作用的穩定細胞株;
在步驟3中,獲取裸鼠腫瘤組織Western Blot及免疫組化檢測MAP4K4及ARP3的表達情況;
在步驟4中,驗證并分析MAP4K4與ARP3的相互作用對裸鼠原代膠質瘤細胞遷移、侵襲能力的影響。
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