[發(fā)明專利]用于檢測磺胺類化合物的組合檢測試劑及其檢測方法

有效

• 申請?zhí)枺?/td>: 201610347829.8
• 申請日: 2016-05-23
• 公開（公告）號: CN106018602B
• 公開（公告）日: 2017-05-31
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 李鷹飛
• 申請（專利權(quán)）人: 青島鎣康食品檢測技術(shù)服務(wù)有限公司
• 主分類號: G01N30/02
• 分類號: G01N30/02;G01N30/06
• 代理公司: 青島聯(lián)信知識產(chǎn)權(quán)代理事務(wù)所37227
• 代理人: 潘晉祥

1.利用用于檢測磺胺類化合物的組合檢測試劑的檢測方法，其特征在于所述檢測方法包括以下步驟：

（1）生物樣品預(yù)處理：對待檢測樣品利用液液萃取法、蛋白沉淀法或?yàn)V膜過濾法進(jìn)行預(yù)處理；

（2） 取所述含有多種磺胺類化合物對照品的有機(jī)溶劑溶液直接進(jìn)樣；獲得每種磺胺類化合物的標(biāo)準(zhǔn)曲線；得到線性方程、相關(guān)系數(shù)和線性范圍；

（3）對預(yù)處理后的待檢測樣品進(jìn)行液相色譜串聯(lián)質(zhì)譜檢測：

色譜條件：色譜柱: ACQUITY UPLC^TM BEH C18柱，50 mm × 2. 1 mm，1. 7 μm；柱溫40 ℃；進(jìn)樣體積5 μl；采用硅膠鍵合相填料柱，流動相由A相+B相組成：A相為乙腈水，乙睛和水的體積比為5：95，A相含體積比為0.03%的甲酸；B相為乙腈，含體積比為0.03%的甲酸或乙酸；A相：B相的體積比為1-99%：99-1%，流速0. 3 ml /min；

質(zhì)譜條件: 采用電噴霧電離源ESI正離子的離子化模式，進(jìn)行多反應(yīng)監(jiān)測MRM掃描，氣簾氣35~40 psi，離子化電壓+5500 V，溫度450~550 °C，噴霧氣40~55 psi，輔助加熱氣40~60 psi，接口加熱氣 On，碰撞氣Medium；

（4）將質(zhì)譜檢測得到的各磺胺類化合物的峰面積，代入步驟（2）中對照品獲得的標(biāo)準(zhǔn)曲線，得到對應(yīng)磺胺類化合物的含量；

所述組合檢測試劑包括：含有多種磺胺類化合物對照品的有機(jī)溶劑溶液和蛋白沉淀劑，含有的每種磺胺類化合物對照品在有機(jī)溶劑溶液中的濃度均為0.1 ng-20 ng/mL，所述蛋白沉淀劑為甲醇、乙腈或乙酸乙酯。

2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的檢測方法，其特征在于：所述步驟（1）中液液萃取法為：將固體待檢測樣品粉碎，加水，勻漿，加入的水體積與樣品重量比為1:1-6:1；之后勻漿液用乙酸乙酯萃取，離心，35-45°C的條件下將有機(jī)相吹干，加入甲醇復(fù)融，離心，取上清液用于分析。

3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的檢測方法，其特征在于：所述步驟（1）中蛋白沉淀法為：將固體待檢測樣品粉碎，加水，勻漿；之后勻漿液加入甲醇或乙腈沉淀，所述甲醇或乙腈的加入體積與樣品重量比為1:1-6:1；離心，取上清液，微孔濾膜過濾，取濾液用于分析。

4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的檢測方法，其特征在于：所述步驟（1）中濾膜過濾法為：將液體待檢測樣品用微孔濾膜過濾，濾液加入甲醇或乙腈沉淀，所述甲醇或乙腈的加入體積與樣品重量比為1:1-6:1；離心，取上清液用于分析。