[發(fā)明專利]一種從發(fā)酵液中高效提取γ?聚谷氨酸的工藝

有效

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• 申請日: 2016-05-17
• 公開（公告）號: CN105837815B
• 公開（公告）日: 2017-11-10
• 發(fā)明（設計）人: 鄒水洋;張樹友;賈夢影;李燕琴
• 申請（專利權(quán)）人: 東莞理工學院
• 主分類號: C08G69/10
• 分類號: C08G69/10
• 代理公司: 天津市北洋有限責任專利代理事務所12201
• 代理人: 羅偉平,潘俊達

1.一種從發(fā)酵液中高效提取γ-聚谷氨酸的工藝，其特征在于，包括以下步驟：

步驟(1)：將微生物發(fā)酵得到的γ-PGA發(fā)酵液通過孔徑為1～50μm濾袋以及孔徑為0.25～1μm的微孔過濾器過濾，或于高速離心機中離心分離，除去發(fā)酵液中大量的不溶性發(fā)酵殘余營養(yǎng)物和菌體；

步驟(2)：在步驟(1)得到的發(fā)酵液中加入三氯乙酸調(diào)節(jié)pH值為3～5，去除發(fā)酵液中的雜蛋白；

步驟(3)：在步驟(2)發(fā)酵液中加入1～30g/L硅藻土吸附發(fā)酵液中的殘余菌體，過濾或離心分離出不溶物，再加入0.5～20g/L活性炭吸附發(fā)酵液中的色素和其它雜質(zhì)，經(jīng)過濾或離心分離獲取上清液；

步驟(4)：在步驟(3)處理后的發(fā)酵液中取樣，即在步驟(3)中的上清液取樣，測量及估算發(fā)酵液中γ-PGA的含量；

步驟(5)：根據(jù)步驟(4)測算的發(fā)酵液中γ-PGA的含量，加入γ-PGA的含量的1～5倍的CTAB，用NaOH溶液調(diào)節(jié)pH值為7～13，混合攪拌1～12h，使得CTAB與發(fā)酵液中γ-PGA充分反應，然后離心分離得到不溶性CTAB/γ-PGA復合物；

步驟(6)：將步驟(5)收集得到的CTAB/γ-PGA復合物置于NaCl溶液中，調(diào)節(jié)pH值為6～9，解離1～12h，得到含有γ-PGA的澄清溶液；

步驟(7)：于步驟(6)γ-PGA澄清溶液中加入γ-PGA澄清溶液體積的2～5倍的乙醇，在溫度為4～10℃的條件下冷卻靜置12～24h，離心得沉淀物，然后將沉淀物冷凍干燥得到高純度的γ-PGA白色結(jié)晶。

2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的從發(fā)酵液中高效提取γ-聚谷氨酸的工藝，其特征在于，所述步驟(1)中的γ-PGA發(fā)酵液為通過微生物液體發(fā)酵獲得的γ-PGA發(fā)酵液。

3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的從發(fā)酵液中高效提取γ-聚谷氨酸的工藝，其特征在于，所述步驟(1)中的γ-PGA發(fā)酵液為在微生物固體發(fā)酵得到的含γ-PGA的固體基質(zhì)中加入固體基質(zhì)體積的8～12倍的蒸餾水進行攪拌浸提0.5～2h后，通過100目篩網(wǎng)過濾去渣獲得的γ-PGA浸提液。

4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的從發(fā)酵液中高效提取γ-聚谷氨酸的工藝，其特征在于，所述步驟(1)中的離心分離，轉(zhuǎn)速為5000～15000rpm，離心時間為5～30min。

5.根據(jù)權(quán)利要求1所述的從發(fā)酵液中高效提取γ-聚谷氨酸的工藝，其特征在于，所述步驟(3)中的過濾是通過孔徑為1-50μm的濾袋以及孔徑為0.25-1μm的微孔過濾器過濾。

6.根據(jù)權(quán)利要求1所述的從發(fā)酵液中高效提取γ-聚谷氨酸的工藝，其特征在于，所述步驟(3)中的離心分離，轉(zhuǎn)速為5000～15000rpm，離心時間為5～30min。

7.根據(jù)權(quán)利要求1所述的從發(fā)酵液中高效提取γ-聚谷氨酸的工藝，其特征在于，所述步驟(6)中的NaCl溶液的濃度為0.1～1.0mol/L。

8.根據(jù)權(quán)利要求1所述的從發(fā)酵液中高效提取的工藝，其特征在于：所述步驟(7)中的乙醇的濃度大于95％。

9.根據(jù)權(quán)利要求1所述的從發(fā)酵液中高效提取的工藝，其特征在于：所述步驟(7)中的冷凍干燥為在壓強為10Pa～30Pa的高真空度下升華干燥至環(huán)境溫度，1～5h后，在壓強為15Pa～30Pa、溫度低于40℃下，干燥4～10h。

10.根據(jù)權(quán)利要求1所述的從發(fā)酵液中高效提取γ-聚谷氨酸的工藝，其特征在于，所述步驟(7)中的γ-PGA白色結(jié)晶為Na-型γ-PGA和H-型γ-PGA的混合物。