[發(fā)明專(zhuān)利]一種胃功能檢測(cè)用免疫層析試劑盒及其制備方法

有效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 201610327064.1
• 申請(qǐng)日: 2016-05-17
• 公開(kāi)（公告）號(hào): CN106018792B
• 公開(kāi)（公告）日: 2018-02-13
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 金鑫;曾濱;趙正道
• 申請(qǐng)（專(zhuān)利權(quán)）人: 北京美康基因科學(xué)股份有限公司;南京美寧康誠(chéng)生物科技有限公司
• 主分類(lèi)號(hào): G01N33/558
• 分類(lèi)號(hào): G01N33/558
• 代理公司: 北京東方匯眾知識(shí)產(chǎn)權(quán)代理事務(wù)所(普通合伙)11296
• 代理人: 張淑賢

1.一種胃功能檢測(cè)用試劑盒的制備方法，其特征在于，所述試劑盒包括塑料板、設(shè)置在塑料板上的玻璃纖維素膜、設(shè)置在玻璃纖維素膜上的硝酸纖維素膜，所述硝酸纖維素膜上一端設(shè)有樣本墊，對(duì)應(yīng)的另一端設(shè)有吸水墊，其特征在于，所述玻璃纖維素膜上包被有量子點(diǎn)標(biāo)記的胃蛋白酶原I抗體、量子點(diǎn)標(biāo)記的胃蛋白酶原II抗體和量子點(diǎn)標(biāo)記的幽門(mén)螺旋桿菌尿素酶抗原的混合物；所述硝酸纖維素膜上設(shè)置有檢測(cè)線1、檢測(cè)線2、檢測(cè)線3和控制線，所述檢測(cè)線1上包被有胃蛋白酶原I二抗，所述檢測(cè)線2上包被有胃蛋白酶原II二抗，所述檢測(cè)線3上包被有幽門(mén)螺旋桿菌尿素酶抗原，所述控制線上包被有羊抗鼠lgG；

具體制備方法包括以下操作步驟：

1)原材料的制備：

A：制備玻璃纖維素膜：將量子點(diǎn)標(biāo)記的胃蛋白酶原I抗體、量子點(diǎn)標(biāo)記的胃蛋白酶原II抗體、量子點(diǎn)標(biāo)記的幽門(mén)螺旋桿菌尿素酶抗原混合包被在玻璃纖維素膜上，干燥，備用；

B：制備硝酸纖維素膜：取硝酸纖維素膜，間隔劃分出檢測(cè)線1、檢測(cè)線2、檢測(cè)線3和控制線，然后將胃蛋白酶原I二抗、胃蛋白酶原II二抗、幽門(mén)螺旋桿菌尿素酶抗原、羊抗鼠lgG分別包被在硝酸纖維素膜的檢測(cè)線1、檢測(cè)線2、檢測(cè)線3和控制線上，之后將包被后的硝酸纖維素膜放入封閉液中封閉，干燥，備用；

2)組裝：在塑料板上放置步驟1)制備的玻璃纖維素模，然后在步驟1)制備的玻璃纖維素膜上放置步驟1)制備的硝酸纖維素膜，然后在硝酸纖維素的一端放置樣品墊，對(duì)應(yīng)的另一端放置吸水墊，干燥，即完成；

其中，步驟A中還包括首先制備量子點(diǎn)標(biāo)記的胃蛋白酶原I抗體、量子點(diǎn)標(biāo)記的胃蛋白酶原II抗體和量子點(diǎn)標(biāo)記的幽門(mén)螺旋桿菌尿素酶抗原的混合物，具體方法包括以下操作步驟：

a：在膠乳顆粒懸濁液中加入改性環(huán)糊精，混勻24小時(shí)，純化，得改性環(huán)糊精-膠乳復(fù)合物懸濁液；

b：在步驟a制備的改性環(huán)糊精-膠乳復(fù)合物懸濁液中加入量子點(diǎn)，混勻24小時(shí)，純化，得量子點(diǎn)-改性環(huán)糊精-膠乳復(fù)合物懸濁液；

c：在步驟b制備的量子點(diǎn)-改性環(huán)糊精-膠乳復(fù)合物懸濁液中加入活化劑，活化15分鐘，純化，之后加入胃蛋白酶原I抗體，混勻2～4小時(shí)后，離心得沉淀物顆粒，將沉淀物顆粒用封閉液重懸，室溫混勻1小時(shí)，之后再進(jìn)行純化，即得量子點(diǎn)標(biāo)記的胃蛋白酶原I抗體；

d：按照上述步驟a～c同樣的方法制備量子點(diǎn)標(biāo)記的胃蛋白酶原II抗體和量子點(diǎn)標(biāo)記的幽門(mén)螺旋桿菌尿素酶抗原，然后將量子點(diǎn)標(biāo)記的胃蛋白酶原I抗體、量子點(diǎn)標(biāo)記的胃蛋白酶原II抗體和量子點(diǎn)標(biāo)記的幽門(mén)螺旋桿菌尿素酶抗原混合，備用。

2.如權(quán)利要求1所述的胃功能檢測(cè)用試劑盒的制備方法，其特征在于，所述改性環(huán)糊精為羧甲基化改性環(huán)糊精或氨基化改性環(huán)糊精。

3.如權(quán)利要求1所述的胃功能檢測(cè)用試劑盒的制備方法，其特征在于，步驟a中所述改性環(huán)糊精與膠乳顆粒的質(zhì)量比為20：1；步驟b中所述量子點(diǎn)與環(huán)糊精-乳膠復(fù)合物的質(zhì)量比為10：1；步驟c中所述胃蛋白酶原I抗體與量子點(diǎn)-改性環(huán)糊精-膠乳復(fù)合物的質(zhì)量比為1：20。

4.如權(quán)利要求1所述的胃功能檢測(cè)用試劑盒的制備方法，其特征在于，步驟A中將量子點(diǎn)標(biāo)記的胃蛋白酶原I抗體、量子點(diǎn)標(biāo)記的胃蛋白酶原II抗體、量子點(diǎn)標(biāo)記的幽門(mén)螺旋桿菌尿素酶抗原混合包被在玻璃纖維素膜上的具體方法為：將量子點(diǎn)標(biāo)記的胃蛋白酶原I抗體、量子點(diǎn)標(biāo)記的胃蛋白酶原II抗體和量子點(diǎn)標(biāo)記的幽門(mén)螺旋桿菌尿素酶抗原混合物均勻噴涂于玻璃纖維素膜上。

5.如權(quán)利要求1所述的胃功能檢測(cè)用試劑盒的制備方法，其特征在于，步驟B中將胃蛋白酶原I二抗、胃蛋白酶原II二抗、幽門(mén)螺旋桿菌尿素酶抗原、羊抗鼠lgG分別包被在硝酸纖維素膜的檢測(cè)線1、檢測(cè)線2、檢測(cè)線3和控制線上的具體方法為：分別取濃度均為1mg/ml的胃蛋白酶原I二抗、胃蛋白酶原II二抗、幽門(mén)螺旋桿菌尿素酶抗原和羊抗鼠IgG，以1ul/cm，10cm/秒的速度分別噴涂到硝酸纖維的檢測(cè)線1、檢測(cè)線2、檢測(cè)線3和控制線上。

6.一種胃功能檢測(cè)用試劑盒，其特征在于，由權(quán)利要求1～5任一項(xiàng)所述的制備方法制備而成。