[發明專利]血清淀粉樣蛋白A（SAA）測定試劑盒

有效

• 申請號: 201610321018.0
• 申請日: 2016-05-16
• 公開（公告）號: CN106053862B
• 公開（公告）日: 2017-09-15
• 發明（設計）人: 張偉林;黃龍梅;王鑫
• 申請（專利權）人: 河北艾馳生物科技有限公司
• 主分類號: G01N33/92
• 分類號: G01N33/92;G01N33/543;G01N21/82
• 代理公司: 北京精金石專利代理事務所(普通合伙)11470
• 代理人: 劉曄

技術領域

本發明屬醫學生物檢測技術領域，具體涉及一種血清淀粉樣蛋白A(SAA)測定試劑盒及其使用方法。

背景技術

血清淀粉樣蛋白A(serum amyloid A，SAA)是一種急性時限反應蛋白，屬于載脂蛋白家族中的異質類蛋白質，相對分子量約12 000。在急性時限反應中，經IL-1、IL-6和TNF刺激，SAA在肝臟中由被激活的巨噬細胞和纖維母細胞合成，可升高到最初濃度的100-1000倍，但半衰期極短，只有50分鐘左右。血清淀粉樣蛋白A與高密度脂蛋白(HDL)有關，它能在炎癥期間調節高密度脂蛋白的代謝。血清淀粉樣蛋白A一個特別重要的特性是其降解產物能以淀粉樣蛋白A(AA)原纖維的方式沉積在不同的器官中，在慢性炎癥疾病中這是一種嚴重的并發癥。

與C反應蛋白(CRP)類似，血清淀粉樣蛋白A的含量濃度是反映感染性疾病早期炎癥的敏感指標，有助于診斷炎癥、評估其活性、監控其活動及治療。但是，血清淀粉樣蛋白A檢測在診斷發生病毒感染、腎移植排斥反應的患者(特別是進行免疫抑制治療的患者)以及用腎上腺皮質激素治療的囊性纖維化患者方面，比C反應蛋白更確鑿。研究發現，在患炎性關節炎的案例中，血清淀粉樣蛋白A與疾病活動性的關系最密切。同時檢測C反應蛋白和血清淀粉樣蛋白A能提高對感染的診斷靈敏度。對于淀粉樣蛋白A淀粉樣變性患者，以將血清淀粉樣蛋白A水平回復至正常為宗旨的治療，能改善病情。

目前已知檢測血清淀粉樣蛋白A的試劑盒較少，方法也存在較大的缺陷，如測定靈敏度不足，操作繁瑣，成本昂貴等，均不利于臨床推廣使用。

發明內容

本發明提供一種血清淀粉樣蛋白A(SAA)測定試劑盒。

本發明還提供上述試劑盒的檢測方法。

為解決上述技術問題，本發明采用的技術方案如下：

一種血清淀粉樣蛋白A(SAA)測定試劑盒，它包括：試劑1(緩沖液)、試劑2(反應液)、校準品及質控品。

上述血清淀粉樣蛋白A(SAA)測定試劑盒，具體包括如下組分：

(1)試劑1：Tris 100mM，疊氮鈉5g/L，PEG-6000 4g/L，PH值為8.1；

(2)試劑2：Tris 100mM，疊氮鈉1g/L，辛基苯酚聚氧乙烯1g/L，尼泊金甲酯1g/L，抗人血清淀粉樣蛋白A抗體膠乳顆粒1g/L，PH值為6.0；

(3)校準品：水平1含血清淀粉樣蛋白A抗原6.25mg/L，疊氮鈉5g/L，水平2含血清淀粉樣蛋白A抗原12.5mg/L，疊氮鈉5g/L，水平3含血清淀粉樣蛋白A抗原25mg/L，疊氮鈉5g/L，水平4含血清淀粉樣蛋白A抗原50mg/L，疊氮鈉5g/L；

(4)質控品：血清淀粉樣蛋白A抗原10mg/L，疊氮鈉5g/L。

所述的試劑1、試劑2、校準品及質控品的溶劑為電導率(25℃)不大于0.1mS/m的純凈水。

所述的抗人血清淀粉樣蛋白A抗體為兔抗人多克隆抗體。

所述的膠乳顆粒為粒徑為80-100nm。

所述的PH值調節試劑為1mM的鹽酸溶液。

所述檢測試劑盒用于定量測定血清中血清淀粉樣蛋白A的含量。

本發明第二方面提供所述測定試劑盒的檢測方法，包括如下步驟：

1)準備編號為1、2、3、4的4支反應管；

2)同時在第1反應管內加入試劑1 150μL，水平1校準品3μL混合均勻，在第2反應管內加入試劑1 150μL，水平2校準品3μL混合均勻，在第3反應管內加入試劑1 150μL，水平3校準品3μL混合均勻，在第4反應管內加入試劑1 150μL，水平4校準品3μL混合均勻，4支反應管均孵育5分鐘；

3)5分鐘孵育結束后，同時在第1反應管內加入試劑2 150μL混合均勻，在第2反應管內加入試劑2 150μL混合均勻，在第3反應管內加入試劑2 150μL混合均勻，在第4反應管內加入試劑2 150μL混合均勻，均孵育半分鐘；

4)半分鐘孵育結束后，分別讀取1、2、3、4反應管吸光度A₁₁,A₁₂,A₁₃,A₁₄；

5)繼續孵育5分鐘后，再次分別讀取1、2、3、4反應管吸光度A₂₁,A₂₂,A₂₃,A₂₄；