[發明專利]一種通過液相色譜法檢測荷葉中荷葉堿的方法

在審

• 申請號: 201610268726.2
• 申請日: 2016-04-27
• 公開（公告）號: CN105717238A
• 公開（公告）日: 2016-06-29
• 發明（設計）人: 陳學松;王麗麗;韋濤;梁美艷;黃新惠
• 申請（專利權）人: 廣西壯族自治區梧州食品藥品檢驗所
• 主分類號: G01N30/02
• 分類號: G01N30/02
• 代理公司: 廣州市越秀區海心聯合專利代理事務所(普通合伙) 44295
• 代理人: 黃為;蔡國

技術領域

本發明涉及實驗室檢測領域，特別是一種通過液相色譜法檢測荷葉中荷葉堿的方法。

背景技術

2015年藥典記錄了荷葉中的荷葉堿的提取方法：取本品粗粉約0.5g，精密稱定，置 具塞錐形瓶中，精密加入甲醇50ml，稱定重量，加熱回流2.5小時，放冷，再稱定重量， 用甲醇補足減失的重量，搖勻，濾過，精密量取續濾液5ml，置10ml量瓶中，加水至刻 度，搖勻，即得。

液相色譜檢測條件為：以十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；以乙腈一水一三乙胺冰醋 酸(27：70.6：1.6：0.78)為流動相；檢測波長為270nm。理論板數按荷葉堿峰計算應不 低于2000。

藥典的方法測試時間長達數小時，萃取和檢測過程復雜，用時長。

發明內容

本發明的目的是提供一種通過液相色譜法檢測荷葉中荷葉堿的方法，該方法采用超聲 萃取法萃取荷葉堿并采用液相色譜法對荷葉堿進行檢測，檢測精度高，對萃取和分析操作 難度低。

本發明提供的技術方案為：一種通過液相色譜法檢測荷葉中荷葉堿的方法，包括以下 步驟：

步驟1：將荷葉粉碎后，過篩，；

步驟2：將荷葉粉與納米二氧化硅混合后研磨，荷葉粉和納米二氧化硅的重量比為 19:1；

步驟3：將步驟2得到的混合物與萃取溶劑混合，萃取溶劑為1重量份的醋酸和4重 量份的甲醇以及5重量份的乙醇混合而成，混合物與萃取溶劑的重量比為1:9；

步驟4：將步驟3的混合物加熱到50-55℃后，將容納有混合物的容器置入超聲波清 洗器中進行萃取得到萃取混合物；萃取時間為30-35min；

步驟5：將步驟4得到的萃取混合物過濾后用步驟3中所述的組分的萃取劑稀釋，將 稀釋后的容易進行液相色譜法分析，測定荷葉堿的含量；

液相色譜法的參數為：

a)儀器：液相色譜儀

b)色譜柱C₁₈色譜柱，5μm4.6×150mm

c)柱溫：40℃

d)流速：0.5mL/min

e)流動相：乙腈-水；乙腈和水的體積比為30:70

f)檢測波長：270nm。

在上述的通過液相色譜法檢測荷葉中荷葉堿的方法中，所述的超聲清洗器的超聲頻率 為200KHz-300KHz

本發明在采用上述技術方案后，其具有的有益效果為：

本發明的檢測方法操作簡單，萃取效果與藥典方法的精度一致，重復性好，樣品用量 少，提取時間短。

在本發明中，在荷葉中添加納米二氧化硅可以提高超聲萃取過程中的萃取效果。

具體實施方式

下面結合具體實施方式，對本發明的技術方案作進一步的詳細說明，但不構成對本發 明的任何限制。

實施例1：

一種通過液相色譜法檢測荷葉中荷葉堿的方法，包括以下步驟：

步驟1：將荷葉粉碎后，過篩；

步驟2：將荷葉粉與納米二氧化硅混合后研磨，荷葉粉和納米二氧化硅的重量比為 19:1；

步驟3：將步驟2得到的混合物與萃取溶劑混合，萃取溶劑為1重量份的醋酸和4重 量份的甲醇以及5重量份的乙醇混合而成，混合物與萃取溶劑的重量比為1:9；

步驟4：將步驟3的混合物加熱到:52℃后，將容納有混合物的容器置入超聲波清洗 器中進行萃取得到萃取混合物；萃取時間為33min；超聲頻率為250KHz。

步驟5：將步驟4得到的萃取混合物過濾后取1ml用步驟3中所述的組分的萃取劑稀 釋至50ml，將稀釋后的容易進行液相色譜法分析，測定荷葉堿的含量；

液相色譜法的參數為：

a)儀器：液相色譜儀

b)色譜柱C₁₈色譜柱，5μm4.6×150mm，即碳18色譜柱，直徑4.6mm，長度150mm， 粒徑5微米。

c)柱溫：40℃

d)流速：0.5mL/min

e)流動相：乙腈-水；乙腈和水的體積比為30:70

f)檢測波長：270nm。

實施例1的檢測方法的精確度測試