[發明專利]用于確認人體是否暴露于乙苯的微RNA及利用其的暴露確認方法

有效

• 申請號: 201610266824.2
• 申請日: 2016-04-26
• 公開（公告）號: CN106854675B
• 公開（公告）日: 2020-11-06
• 發明（設計）人: 柳在泉;宋美京;趙允;鄭勝燦
• 申請（專利權）人: 韓國科學技術研究院
• 主分類號: C12Q1/6888
• 分類號: C12Q1/6888;C40B40/06
• 代理公司: 北京三聚陽光知識產權代理有限公司 11250
• 代理人: 程鋼

本發明涉及用于確認人體是否暴露于乙苯(Ethylbenzene)的微RNA及利用其確認人體是否暴露于乙苯的方法，具體而言，把表達因乙苯而特異性增加或減少的微RNA用作生物標記，可以有用地用于在暴露于環境中的人體試料中監視及判定乙苯的污染，可以用作查明因乙苯而誘發的毒性作用機理的工具。

技術領域

本發明涉及用于確認人體是否暴露于乙苯的微RNA及利用其的確認方法，更詳細而言，涉及一種因暴露于乙苯而特異性地發生表達變化的微RNA及利用其的確認人體是否暴露于乙苯的方法。

背景技術

最近，作為與遺傳基因表達調節相關的調節性RNA的重要類別，微RNA(miR,miRNA，小分子核糖核酸)日益抬頭。這些小型(典型的是18-24個核苷酸長度)非編碼RNA分子通過促進RNA分解、抑制mRNA翻譯及對遺傳基因轉錄的影響而能夠調節蛋白質表達模式。微RNA調節發育及分化、細胞增殖控制、應激反應等多樣的生物學過程。現在已知約1000個以上人類微RNA。

微RNA借助于RNA聚合酶II(pol II)或RNA聚合酶III(pol III；參照Qi,P.etal.Cell.Mol.Immunol.3,411-419,2006)而轉錄，各個微RNA遺傳基因、蛋白質編碼遺傳基因的基因內區也可以從主要對多個密切相關的微RNA進行編碼的多順反子轉錄物進行介導。基于RNA pol II或pol III的miRNA遺傳基因的轉錄，一般生產數千堿基長度的稱為原始miRNA轉錄物(pri-miRNAs)的最初轉錄物。在核中，pri-miRNAs借助于RNAse、Drosha而加工，生產70-至100-核苷酸發夾-狀前體(pre-miRNAs)。運輸到細胞質后，發夾pre-miRNA為了生產雙鏈miRNA而被DICER追加進行加工。熟化的miRNA鏈混合于RNA-介導沉默復合體(RISC)內，其中，熟化的miRNA借助于堿基對互補性而與其標的mRNAs結合。miRNA堿基對與mRNA標的完美一致的比較罕見情形，其促進mRNA分解。進一步一般而言，miRNAs形成與標的mRNAs不完全一致的異型雙鏈，對mRNA翻譯產生影響。

微RNA機制對癌發病、細胞老化、臟器的成長等產生重要影響，因此，微RNA相關研究不僅在查明癌發病、老化等生命現象與人的關系方面發揮中心作用，而且，預計今后還將能夠應用于發生及分化或基于干細胞的細胞治療劑開發等研究，奠定韓國生物研究的核心領域地位。因此，微RNA標記的發掘將對預測包括癌在內的疾病的早期診斷可能性帶來很多幫助，從這一點而言具有意義。

而且，微RNA標記被認為在特定環境有害物質的暴露預測方面也可以有用地使用。截止目前，主要進行因暴露于環境有害物質而導致的遺傳基因(mRNA)變化形態及與因此導致的疾病的關聯性相關研究，但最近，隨著對與微RNA的關聯性的關注日益增加，在一些研究中，觀察了因暴露于諸如benzene(苯)、arsenic(砷)或RDX的有害物質而導致的微RNA的表達變化，把特異性地表達發生變化的微RNA及其標的遺傳基因，作為對有害物質的標記而提出(Baccarelli,參照A.Bollati,V.Curr.Opin.Prediatr.21,243-251,2009)。另外，發掘的微RNA不僅作為用于暴露預測的標記，而且作為調節標的遺傳基因的表達的調節者，也可以作為用于環境有害物質的毒性機理預測的標記而有用地使用。盡管可以說微RNA標記在環境有害物質暴露及毒性機理預測中的作用非常重要，但目前微RNA相關研究主要局限于疾病診斷用標記發掘，對在多樣環境中暴露可能性很大的諸如揮發性有機化合物類的有害物質暴露導致的微RNA表達變化的研究不足。另外，后成遺傳學變化與諸如遺傳基因表達的遺傳學變化的多樣性相比，其程度不嚴重，因此，與需要多種標記的遺傳基因表達性能分析相比，具有利用諸如一個微RNA或DNA甲基化的后成(epigenetic)標記，便可以早期診斷疾病或有害物質暴露的優點，而且具有能夠以非侵入式方法進行診斷的優點。各微RNA調節多樣的標的遺傳基因，在高等真核生物中存在千余個微RNA，因而預計，可借助于微RNA進行調節的潛在機會巨大。