[發明專利]一種人參葉中人參皂苷的分析方法

在審

• 申請號: 201610254596.7
• 申請日: 2016-04-22
• 公開（公告）號: CN105738537A
• 公開（公告）日: 2016-07-06
• 發明（設計）人: 陳學松;廖強;韋日偉;陳佳麗;王華;姚泳成
• 申請（專利權）人: 廣西壯族自治區梧州食品藥品檢驗所
• 主分類號: G01N30/06
• 分類號: G01N30/06
• 代理公司: 廣州市越秀區海心聯合專利代理事務所(普通合伙) 44295
• 代理人: 黃為;蔡國

技術領域

本發明涉及實驗室檢測領域，特別是一種人參葉中人參皂苷的分析方法。

背景技術

2015年藥典記載：取本品粉末約0.2g，精密稱定，置索氏提取器中，加三氯甲烷30ml，加熱回流1小時，棄去三氯甲烷液，藥渣揮去三氯甲烷，加甲醇30ml，加熱回流3小時，提取液低溫蒸干，加水10ml使溶解，加石油醚(30～60℃)提取2次，每次10ml，棄去醚液，水液通過D101型大孔吸附樹脂柱(內徑為1.5cm，柱長為15cm)，以水50ml洗脫，棄去水液。再用20％乙醇50ml洗脫，棄去20％乙醇洗脫液，繼用80％乙醇80ml洗脫，收集洗脫液70ml，蒸干，殘渣加甲醇溶解，轉移至10ml量瓶中，加甲醇至刻度，搖勻，濾過，取續濾液，即得。LC測試的條件為：以十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；以乙腈-0.05％磷酸溶液(20：80)為流動相；檢測波長為203nm。理論板數按人參皂苷Re峰計算應不低于1500。

在大孔吸附樹脂柱分離人參皂苷的過程中，分離效率受到大孔吸附樹脂柱的活性、洗脫效率等因素的影響，在測試的過程中，測試重復性差。

為了改進這一問題，我們開發出了一種采用甲醇作為萃取劑的ASE快速萃取人參皂苷的方法，該方法能快速的提取人參皂苷，且提取精度也較高。

但是，在測試過程中，我們發現采用甲醇萃取時萃取精度不穩定。

發明內容

本發明的目的是提供一種人參葉中人參皂苷的分析方法，該方法檢測精度高，萃取簡單，萃取效果要高于藥典的方法。

本發明提供的技術方案為：一種人參葉中人參皂苷的分析方法，包括以下步驟：

步驟1：將人參葉粉碎后采用ASE萃取法得到萃取液；

其中，步驟1具體包括：

S11：將0.2重量份人參葉粉碎后與1重量份石英砂混合均勻；

S12：將混合物加入到鋪設有硅藻土的萃取池中，然后繼續加入硅藻土直至達到萃取池池口，蓋上萃取池的蓋子，采用ASE萃取法進行萃取；

萃取條件為：萃取溶劑為體積比為1：1的乙醇和甲醇的混合物，萃取溫度100℃；靜態萃取時間5min；沖洗體積100％；靜態循環次數1次；靜態萃取的壓力為1500psi；

步驟2：將萃取液在石墨碳SPE柱存在的條件下離心，對離心后的液體過濾得到濾液；

步驟3：將濾液采用液相色譜法分析；

液相色譜分析條件為：

a)儀器：雙三元液相色譜儀

b)色譜柱：50×2.1mm1.7μm

c)柱溫：40℃

d)流速：0.3mL/min

e)流動相：乙腈-水；梯度洗脫；

其中梯度洗脫具體為在0-1min時流動相為乙腈：水，其體積比為60:40；1-3min時流動相為乙腈：水，其體積比為70:30；3-8min時流動相為乙腈：水，其體積比為80:20；

f)檢測波長：203nm。

在上述的人參葉中人參皂苷的分析方法中，所述的萃取池的體積為10ml。

在上述的人參葉中人參皂苷的分析方法中，所述的步驟2具體為將萃取液稀釋后加入到離心管中凈化，然后過濾后得到濾液，所述的離心管中加有石墨碳SPE柱。

在上述的人參葉中人參皂苷的分析方法中，所述的雙三元液相色譜儀為ThermoU3000UHPLC液相色譜儀，所述的色譜柱為ThermoSyncronisC18色譜柱，所述的ASE萃取法采用的是ASE350快速溶劑萃取儀。

本發明在采用上述技術方案后，其具有的有益效果為：

本發明的檢測精度高，萃取簡單，萃取效果相比于藥典要高。

具體實施方式

下面結合具體實施方式，對本發明的技術方案作進一步的詳細說明，但不構成對本發明的任何限制。

實施例1：

將人參葉樣品經粉碎機粉碎，過三號篩，約0.2g，精密稱定，與1g石英砂混合均勻，待用，移入到預先放好過濾膜的ASE10ml萃取池中再加入適量硅藻土，輕輕振搖使之與池口在同一水平線上，擰緊萃取池上蓋。萃取結束后，把萃取液轉移至蒸發皿中蒸干后用甲醇溶解并定容至10mL容量瓶，吸取1ml樣品液加入裝有100mg石墨碳SPE柱的2ml離心管進行凈化，溶液過0.22微米濾膜后進入HPLC測定。

萃取條件(見表1)為：

表1

分析方法為LC液相色譜法，液相色譜分析條件：

a)儀器：Thermo雙三元液相(U-3000)