[發明專利]一種桑樹粉提取液及其應用

在審

• 申請號: 201610237497.8
• 申請日: 2016-04-15
• 公開（公告）號: CN105695345A
• 公開（公告）日: 2016-06-22
• 發明（設計）人: 楊焱;姜福春;馮杰;張勁松;張赫男;劉艷芳;顏夢秋;吳迪;唐傳紅;唐慶九;汪雯翰;張忠;周帥;馮娜
• 申請（專利權）人: 上海市農業科學院
• 主分類號: C12N1/14
• 分類號: C12N1/14;C12R1/645
• 代理公司: 上海容慧專利代理事務所(普通合伙) 31287
• 代理人: 張竹梅

技術領域

本發明涉及生物提取及微生物發酵領域，具體的說涉及一種桑樹粉提取液 及其應用。

背景技術

由于天然野生桑黃被大面積采集，使得桑黃資源嚴重匱乏。同時，人工栽 培桑黃的技術，還不是很成熟，加之桑黃培養條件較為苛刻，生長周期長，這 使得桑黃來源不穩定。為此，采用液體發酵生產桑黃菌絲體代替桑黃子實體已 成為當務之急，液體發酵培養的菌絲體具有產量高、培養周期短、可控性好等 優點，更易于工業化持續大量生產，具有廣泛的市場前景。

至今，適宜條件下的液體培養桑黃菌絲體需要十天以上的時間，且其菌絲 體生長不良及菌絲體產量較少。同時，目前桑黃菌絲體深層發酵培養基僅僅是 依靠碳氮源來篩選最佳培養基配方，急需開發生長周期短，產量高的培養基。

發明內容

本發明的目的之一在于提供一種桑樹粉提取液，其是由如下方法制備得到 的：

將粉碎至60-80目的桑樹粉中加入水，桑樹粉與水的重量比為1-3：100， 于100℃蒸煮0.5-2h后過濾，得上清液即為所需的桑樹粉提取液。

本發明還提供了一種應用上述桑樹粉提取液制備的桑黃菌絲體的種子培養 基，該桑黃菌絲體的種子培養基，由桑樹粉提取液、馬鈴薯葡萄糖肉湯和水組 成，其中馬鈴薯葡萄糖肉湯的重量百分比為2.4％；其中制備桑樹粉提取液所用 的桑樹粉與馬鈴薯葡萄糖肉湯的重量比為1-3：2.4。

本發明還提供了一種由上述桑樹粉提取液制備的桑黃菌絲體的發酵培養 基，其特征在于其由桑樹粉提取液、酵母粉、葡萄糖、磷酸二氫鉀、硫酸鎂和 水組成，其中酵母粉、葡萄糖、磷酸二氫鉀、硫酸鎂的重量百分比分別為1％、 2％、0.1％和0.1％；其中桑樹粉提取液所用的桑樹粉與酵母粉的重量比為1-3： 1。

本發明還提供了一種應用上述種子培養基進行桑黃菌種培養的方法，其特 征在于包括如下步驟：

將活化后的桑黃菌種接種于種子培養基中，于24-30℃，120-180rpm培 養箱培養5-10天，得種子液。

本發明還提供了一種應用上述發酵培養基進行桑黃菌絲體培養的方法，其 特征在于包括如下步驟：

將種子液按10％的接種量接種于發酵培養基中，于24-30℃，120-180rpm 培養箱培養5-10天，得發酵液。

本發明突破了食用菌培養領域的傳統觀念，在種子培養基和發酵培養基 中加入桑樹粉的提取液，既選擇了桑黃菌株依賴桑樹的親緣生長的性狀，又解 決了桑黃液體生產發酵過程中生長較為緩慢且不良的問題，同時大幅提高了液 體培養菌絲體的產量，使桑黃菌種培養7天后種子液生物量達到7.73g/L，桑 黃發酵培養基培養6天后搖瓶生物量達到17.15g/L，分別高于對照組4.43g/L 和2.42g/L。

本發明首次在桑黃液體培養基中添加桑樹粉提取液，培養后菌絲體的生物 量大大提高，充分證實桑樹粉提取液能大大促進了菌體的深層發酵，使得菌絲 體的生物量增加。

具體實施方式

菌種：桑黃Sanghuangporussanghuang(該菌株已在菌物學報，2016,35(5)： 1-12發表)，由上海市農業科學院食用菌研究所加工技術與發酵工程研究室保 藏

桑樹粉(購自安徽亳州馬力藥業有限公司)

馬鈴薯葡萄糖肉湯(購自美國BD公司)

菌絲體干重的測定：分別將種子液和發酵液，于5000r/min離心10min， 棄上清液，用蒸餾水洗滌離心沉淀3-4次，收集沉淀于60℃干燥至恒重，再測 定菌絲體干重。

實施例1

(1)桑樹粉提取液的制備：分別稱取粉碎為60-80目桑樹粉1g、2g、3g， 加入蒸餾水，100℃維持蒸煮1h，過濾所得上清液即為桑樹粉提取液。

(2)種子培養基制備：將上述三組提取液，分別加入馬鈴薯葡萄糖肉湯 2.4g，加蒸餾水定容到100mL，分別作為試驗組1-3組。

(3)對照組：馬鈴薯葡萄糖肉湯2.4g，加入蒸餾水定容到100mL。

(4)四組培養基進行分裝，于滅菌鍋中121℃，滅菌35min。