[發明專利]一種牛奶中乳果糖的檢測方法

有效

• 申請號: 201610223749.1
• 申請日: 2016-04-12
• 公開（公告）號: CN105784868B
• 公開（公告）日: 2017-12-01
• 發明（設計）人: 楊曉敏;王建軍;孟瑾;鄭小平;何亞斌;高勇興
• 申請（專利權）人: 上海必諾檢測技術服務有限公司
• 主分類號: G01N30/02
• 分類號: G01N30/02;G01N30/06
• 代理公司: 上海泰能知識產權代理事務所31233
• 代理人: 黃志達,魏峯

1.一種牛奶中乳果糖的檢測方法，包括：

(1)取牛奶樣品用水稀釋后，依次加入亞鐵氰化鉀溶液和硫酸鋅溶液，靜置，過濾，收集濾液；加入β-D-半乳糖苷酶，混勻后加蓋，于50～60℃恒溫培養1～2h；然后依次加入葡萄糖氧化酶、正辛醇、氫氧化鈉溶液、過氧化氫和過氧化氫酶，于45～50℃恒溫培養3～4h；冷卻后定容，過濾，凈化，收集濾液作為待測液；其中β-D-半乳糖苷酶、葡萄糖氧化酶、氫氧化鈉溶液、過氧化氫、過氧化氫酶與濾液的體積比為0.1:0.1:0.5:0.05:0.1:5；

(2)采用具有安培檢測器的離子色譜儀分析步驟(1)中的待測液，得到乳果糖的含量；其中離子色譜儀分析的條件為：

檢測器：ED40電化學檢測器，參比電極為Ag/AgCl、Au電極；

色譜柱：CarboPac PA10色譜分離柱；

流動相：超純水；

流速：1.0mL/min；

淋洗液：10mmol/L KOH；

進樣體積：25μL。

2.根據權利要求1所述的一種牛奶中乳果糖的檢測方法，其特征在于：所述步驟(1)中的牛奶樣品為鮮牛乳或牛奶的添加物。

3.根據權利要求1所述的一種牛奶中乳果糖的檢測方法，其特征在于：所述步驟(1)中的亞鐵氰化鉀溶液的濃度為200g/L，與牛奶樣品的體積比為1:5；硫酸鋅溶液的濃度為200g/L，與牛奶樣品的體積比為1:5。

4.根據權利要求1所述的一種牛奶中乳果糖的檢測方法，其特征在于：所述步驟(1)中加入硫酸鋅溶液后加入緩沖液調整溶液pH值至7.5；加入β-D-半乳糖苷酶恒溫培養后加入緩沖液調整溶液pH值至7.6。

5.根據權利要求1所述的一種牛奶中乳果糖的檢測方法，其特征在于：所述步驟(1)中的過濾采用0.45μm水相濾膜過濾；凈化采用C18小柱凈化。

6.根據權利要求1所述的一種牛奶中乳果糖的檢測方法，其特征在于：所述色譜柱的規格為：長度250mm×內徑4mm。

7.根據權利要求1所述的一種牛奶中乳果糖的檢測方法，其特征在于：所述步驟(2)中的乳果糖的含量采用外標法定量。