[發明專利]一種雙重適配體修飾的靶向給藥系統及其制備方法

有效

• 申請號: 201610217334.3
• 申請日: 2016-04-08
• 公開（公告）號: CN105664177B
• 公開（公告）日: 2018-09-21
• 發明（設計）人: 鐘志容;劉中兵;景沛;張孝琴
• 申請（專利權）人: 鐘志容
• 主分類號: A61K47/60
• 分類號: A61K47/60;A61K47/62;A61K48/00;A61K31/704;A61P35/00
• 代理公司: 北京科億知識產權代理事務所(普通合伙) 11350
• 代理人: 湯東鳳

1.一種靶向給藥系統，由聚乙二醇、肽適配體DUP-1、RNA適配體A10-3.2、含PTEN的重組腺病毒Ad5和抗腫瘤藥物組成，其中，所述聚乙二醇為兩端用羧 基封端的聚乙二醇，其特征在于，采用兩端用羧 基封端的聚乙二醇為連接臂，將RNA適配體A10-3.2和肽適配體DUP-1，通過化學步驟連接到含有抑癌基因PTEN的重組腺病毒Ad5表面，然后將阿霉素以嵌入作用方式與RNA雙鏈適配體A10-3.2結合得到。

2.根據權利要求1所述的靶向給藥系統，其特征在于所述RNA適配體A10-3.2與抗腫瘤藥物的摩爾濃度比為2:1。

3.根據權利要求1所述的靶向給藥系統，其特征在于，所述肽適配體DUP-1的氨基酸序列為：FRPNRAQDYNTN，所述RNA適配體A10-3.2的序列為：5'-GGGAGGACGAUGCGGAUCAGCCAUGUUUACGUCACUCCU-3'。

4.根據權利要求1所述的靶向給藥系統，其特征在于，所述抗腫瘤藥物為鹽酸阿霉素。

5.根據權利要求1所述的靶向給藥系統，其特征是所述的聚乙二醇的重均分子量為400-8000。

6.根據權利要求5所述的靶向給藥系統，其特征是所述的聚乙二醇的重均分子量為2000-5000。

7.權利要求1所述的靶向給藥系統在制備靶向治療前列腺癌藥物中的用途。

8.權利要求1所述的靶向給藥系統的制備方法，其具體步驟如下：

第一步：首先取一定量的聚乙二醇溶液，然后再加入N-羥基丁二酰亞胺和碳二亞胺鹽酸鹽，用MES緩沖液調節pH至6.0，在室溫下攪拌1h，以隨機活化聚乙二醇中的羧基，然后加入腺病毒原液，于37℃攪拌反應2h，攪拌速度為300r/min，制備得到PEG-Ad5；

第二步：取精制得到的PEG-Ad5，加入N-羥基丁二酰亞胺溶液和碳二亞胺鹽酸鹽溶液，用MES緩沖液調節pH至6.0，在室溫下輕柔攪拌，孵育1h，以活化精制PEG-Ad5中另一個未反應的羧基，然后向反應液中加入DUP-1適配體溶液，于37℃攪拌避光反應2h，攪拌速度為300r/min，制備得到DUP-1-PEG-Ad5；

第三步：取精制得到的DUP-1-PEG-Ad5，加入N-羥基丁二酰亞胺溶液和碳二亞胺鹽酸鹽溶液，用MES緩沖液調節pH至6.0，在室溫下輕柔攪拌，孵育1h，以活化精制DUP-1-PEG-Ad5中其余未反應的羧基，然后用MES緩沖液調節反應液pH至7.0，加入A10-3.2適配體溶液，于37℃攪拌避光反應2h，攪拌速度為300r/min，制備得到A10-3.2/DUP-1-PEG-Ad5，最后用分子截留量為100KD的超濾離心管進行超濾離心，洗滌后得到精制的A10-3.2/DUP-1-PEG-Ad5；

第四步：將精制的A10-3.2/DUP-1-PEG-Ad5反應液稀釋，根據DOX能嵌入到雙鏈RNA適配體A10-3.2中的最大量，于反應液中加入一定量的DOX，再加入一定量的無水DMSO，于室溫下攪拌避光反應48h，然后經過超濾離心、洗滌后，得到目標給藥系統。