[發明專利]Fah基因缺失動物的程序化慢性肝損傷維持及其在制備異源化肝臟模型中的應用

有效

• 申請號: 202011379101.6
• 申請日: 2020-11-30
• 公開（公告）號: CN113440502B
• 公開（公告）日: 2022-10-18
• 發明（設計）人: 鄭允文;葛劍云;劉莉萍
• 申請（專利權）人: 先見明創醫藥科技（蘇州）有限公司
• 主分類號: A61K31/122
• 分類號: A61K31/122;A61K31/407;A61P1/16;A01K67/027
• 代理公司: 上海專利商標事務所有限公司 31100
• 代理人: 陳靜

1.一種維持Fah基因缺失動物模型的慢性肝損傷的方法，所述方法包括使Fah基因缺失動物模型按照以下程序服用尼替西農：

(1)持續5～8天每天服用低劑量尼替西農，所述低劑量為0.01～0.08 mg/kg動物體重/天；

(2)持續3～5天每天服用高劑量尼替西農，所述高劑量為0.35～1.2 mg/kg動物體重/天；

(3)進行步驟(1)和(2)的循環；

所述動物為大鼠；所述動物表現T細胞、B細胞和NK細胞缺失，其還包括以下基因缺失：白介素2受體γ基因，重組激活基因2。

2.一種制備異源化肝移植動物模型方法，所述動物模型具有異源化肝臟，所述方法包括使動物模型按照以下程序服用尼替西農：

(1)持續5～8天每天服用低劑量尼替西農，所述低劑量為0.01～0.08 mg/kg動物體重/天；

(2)持續3～5天每天服用高劑量尼替西農，所述高劑量為0.35～1.2mg/kg動物體重/天；

(3)進行步驟(1)和(2)的循環；

并且，在上述程序起始后的第3～30天，對動物進行異源肝細胞的移植；

所述動物為大鼠；所述動物表現T細胞、B細胞和NK細胞缺失，其還包括以下基因缺失：白介素2受體γ基因，重組激活基因2。

3. 如權利要求1或2所述的方法，其特征在于，在進行所述程序之前，還包括：以惹卓堿預處理所述動物，惹卓堿的用量為10～50 mg/kg動物體重。

4. 如權利要求3所述的方法，其特征在于，惹卓堿的用量為20～40 mg/kg動物體重。

5. 如權利要求4所述的方法，其特征在于，惹卓堿的用量為25～35 mg/kg動物體重。

6.如權利要求1或2所述的方法，其特征在于，步驟(1)中，持續6～8天每天服用低劑量尼替西農。

7.如權利要求6所述的方法，其特征在于，持續7天每天服用低劑量尼替西農。

8. 如權利要求1或2所述的方法，其特征在于，步驟(1)中，所述低劑量為0.01～0.05mg/kg動物體重/天。

9.如權利要求1或2所述的方法，其特征在于，步驟(2)中，持續4天每天服用高劑量尼替西農。

10. 如權利要求1或2所述的方法，其特征在于，步驟(2)中，所述高劑量為0.35～1 mg/kg動物體重/天。

11.如權利要求2所述的方法，其特征在于，所述的異源肝細胞包括：與該動物模型屬于不同物種的人源、小鼠源、豬源、猴源或狗源的肝細胞。

12.如權利要求11所述的方法，其特征在于，所述的異源肝細胞選自：

(a)原代肝細胞；

(b)誘導多能性干細胞與胚胎干細胞誘導分化而來的肝干/祖細胞、肝細胞或肝樣細胞或內胚層細胞；

(c)內胚層及其他胚層干細胞誘導分化而來的肝干/祖細胞、肝細胞或肝樣細胞；

(d)成體或胎兒干/祖細胞或肝細胞及其他體細胞直接轉分化而來的肝干/祖細胞、肝細胞或肝樣細胞；

(f)(a)～(d)來源的細胞經體外誘導擴增后的肝干/祖細胞、肝細胞或肝樣細胞。