[發明專利]一種青海云杉成熟合子胚愈傷組織誘導的培養基及方法有效
| 申請號： | 201610212622.X | 申請日： | 2016-04-07 |
| 公開（公告）號： | CN105850731B | 公開（公告）日： | 2018-01-09 |
| 發明（設計）人： | 張瑩花;徐先英;賀訪印;王方琳 | 申請（專利權）人： | 甘肅省治沙研究所 |
| 主分類號： | A01H4/00 | 分類號： | A01H4/00 |
| 代理公司： | 北京高沃律師事務所11569 | 代理人： | 劉奇 |
| 地址： | 733000 甘肅*** | 國省代碼： | 甘肅;62 |
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| 摘要： | |||
| 搜索關鍵詞： | 一種 青海 云杉 成熟 合子 胚愈傷 組織 誘導 培養基 方法 | ||
1.一種青海云杉成熟合子胚愈傷組織誘導的培養基，其特征在于，該愈傷組織誘導培養基為S培養基+2,4-D 1mg·L-1+6-BA 2mg·L-1+KT 4mg·L-1，該培養基含34g·L-1蔗糖，8g·L-1瓊脂，0.5g·L-1水解酪蛋白，pH為5.8。
2.一種青海云杉成熟合子胚愈傷組織的誘導方法，其特征在于，包括如下步驟：
(1)培養基配制：按S培養基配方配置基本培養基，然后添加1mg·L-1的2,4-D、2mg·L-1的6-BA、4mg·L-1的KT和0.5g·L-1的水解酪蛋白，以及34g·L-1蔗糖和8g·L-1瓊脂，pH為5.8，分裝滅菌后備用；
(2)外植體消毒：將青海云杉種子于水中浸泡10-15h后，用鑷子剝去種皮；然后，用75％酒精對去皮的種子進行表面消毒；再用0.1％HgCl2對種子深度滅菌，然后用無菌水沖洗；最后，在無菌條件下，用無菌濾紙吸干種子表面水分；
(3)種胚分離：在無菌條件下，用消過毒的尖頭鑷子夾掉種子胚根段的尖端部分，然后用鑷子壓種子中部得到種胚；
(4)接種和培養：在無菌條件下，將種胚平行接種于培養基的表面，置于25℃條件下暗培養；
(5)愈傷組織的增殖：愈傷組織形成后，將之轉接于誘導培養基，進行增殖培養。
3.根據權利要求2所述的一種青海云杉成熟合子胚愈傷組織的誘導方法，其特征在于，所述步驟(2)中，將青海云杉種子于水中浸泡12h。
4.根據權利要求2所述的一種青海云杉成熟合子胚愈傷組織的誘導方法，其特征在于，所述步驟(2)中，用酒精對去皮的種子進行表面消毒的時間為5min。
5.根據權利要求2所述的一種青海云杉成熟合子胚愈傷組織的誘導方法，其特征在于，所述步驟(2)中，用無菌水沖洗5次，每次5min。
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