[發明專利]一種豬流行性腹瀉病毒的多重RT-PCR檢測試劑盒在審
| 申請號： | 201610194077.6 | 申請日： | 2016-03-31 |
| 公開（公告）號： | CN105695635A | 公開（公告）日： | 2016-06-22 |
| 發明（設計）人： | 秦毅斌;盧冰霞;段群棚;何穎;李斌;梁家幸;蘇乾蓮;周英寧;蔣冬福;盧敬專;趙武 | 申請（專利權）人： | 廣西壯族自治區獸醫研究所 |
| 主分類號： | C12Q1/70 | 分類號： | C12Q1/70;C12Q1/68;C12R1/93 |
| 代理公司： | 廣州市紅荔專利代理有限公司 44214 | 代理人： | 李彥孚;何承鑫 |
| 地址： | 530000 廣西壯族*** | 國省代碼： | 廣西;45 |
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| 摘要： | |||
| 搜索關鍵詞： | 種豬 流行性 腹瀉 病毒 多重 rt pcr 檢測 試劑盒 | ||
1.一種豬流行性腹瀉病毒的多重RT-PCR檢測試劑盒，其特征在于，所述試劑盒包括以 下引物序列：
ORF3-F5’-gcgcgttttgctgtcat-3’（SEQID1），
ORF3-R5’-gtcaccaccttctaaaatcac-3’（SEQID2）；
S-P15’-gaaaaccagggtgtcaat-3’（SEQID3），
S-P25’-cagcaagaatgacagaggtg-3’（SEQID4）。
2.根據權利要求1所述的豬流行性腹瀉病毒的多重RT-PCR檢測試劑盒，其特征在于，所 述的引物ORF3-F、ORF3-R擴增PEDV的ORF3基因片段。
3.根據權利要求1所述的豬流行性腹瀉病毒的多重RT-PCR檢測試劑盒，其特征在于，所 述試劑盒包括以下組分：RT-PCR反應緩沖液、反轉錄酶、聚合酶。
4.根據權利要求3所述的豬流行性腹瀉病毒的多重RT-PCR檢測試劑盒，其特征在于，所 述的RT-PCR反應緩沖液包括RNA模板14μL，5×PrimeScriptTM緩沖液4μL，RTEnzyme Mix1.0μL，反轉錄引物Oligo18T1.0μL。
5.根據權利要求3所述的豬流行性腹瀉病毒的多重RT-PCR檢測試劑盒，其特征在于，所 述的RT-PCR反應條件為：95℃預變性3min；94℃變性40s，52℃復性40s，72℃延伸50s， 40個循環；最后72℃延伸8min。
6.根據權利要求1所述的豬流行性腹瀉病毒的多重RT-PCR檢測試劑盒在檢測豬流行性 腹瀉病毒變異毒株、經典毒株及弱毒疫苗株的應用。
7.根據權利要求6所述的豬流行性腹瀉病毒的多重RT-PCR檢測試劑盒的應用，其特征 在于，所述的引物ORF3-F、ORF3-R擴增變異毒株和經典毒株預期目的片段大小為234bp，弱 毒疫苗株預期目的片段大小為185bp。
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