[發明專利]一種食用菌蛋白肽-硒螯合物的制備方法

在審

• 申請號: 201610187974.4
• 申請日: 2016-03-30
• 公開（公告）號: CN105768086A
• 公開（公告）日: 2016-07-20
• 發明（設計）人: 趙立娜;劉斌;陳濠;陳紫紅;肖正;呂旭聰;劉曉艷;林占熺
• 申請（專利權）人: 福建農林大學
• 主分類號: A23L33/00
• 分類號: A23L33/00;A23J1/00;A23J3/34
• 代理公司: 福州元創專利商標代理有限公司 35100
• 代理人: 蔡學俊

1.一種食用菌蛋白肽-硒螯合物的制備方法，其特征在于包括如下步驟：

（1）、堿溶酸沉：利用堿溶酸沉法提取食用菌蛋白或用硫酸銨沉降法提取食用菌蛋白；

（2）、酶解：采用蛋白酶對提取的食用菌蛋白進行酶解，滅酶，制備食用菌蛋白多肽復合物溶液；

（3）、多肽-硒螯合物制備：利用固體高溫混合法或者液體螯合法制備食用菌蛋白肽-硒螯合物；

（4）、將食用菌蛋白肽-硒螯合物進行冷凍干燥。

2.根據權利要求1所述一種食用菌蛋白肽-硒螯合物的制備方法，其特征在于：所述食用菌包括：香菇、黑木耳、平菇、蟹味菇、茶樹菇、茯苓、桑黃、草菇、金針菇、杏鮑菇、銀耳、竹蓀等食藥用菌中的一種。

3.根據權利要求1所述一種食用菌蛋白肽-硒螯合物的制備方法，其特征在于：步驟（1）中，所述堿溶酸沉的具體步驟如下：首先將食用菌超微粉碎，將粉碎后的食用菌與蒸餾水以1：20-60w/v的比例混合，利用0.5-2.0wt.%的NaOH或KOH溶液調節pH至9.0-11.0，超聲提取10-50min，水浴提取60-120min，溫度50-100℃，提取后過濾，獲得濾液，濾液為堿提的食用菌蛋白溶液，用鹽酸調節堿提的食用菌蛋白溶液pH至2.5-4.0進行蛋白沉淀，3000-5000r/min離心5-10min得沉淀蛋白，水洗至中性再次離心，將沉淀冷凍干燥即得食用菌蛋白。

4.根據權利要求1所述一種食用菌蛋白肽-硒螯合物的制備方法，其特征在于：步驟（1）中，所述硫酸銨沉降的具體步驟如下：首先將食用菌超微粉碎，將粉碎后的食用菌與蒸餾水以1：20-60w/v的比例混合，逐步加入固體硫酸銨使硫酸銨的飽和度達40-60wt.%，3000-5000r/min離心5-10min，棄上清液，得食用菌蛋白沉淀，利用透析法脫鹽后冷凍干燥得食用菌蛋白。

5.根據權利要求1所述一種食用菌蛋白肽-硒螯合物的制備方法，其特征在于：步驟（2）中，所述酶解的具體步驟如下：將食用菌蛋白溶解在水中使蛋白質量濃度達1.0-5.0%，調節pH至7.0-11.0，溫度保持在40-60℃，加入1.0-5.0wt.%蛋白酶，水解30-90min，滅酶，得到食用菌蛋白多肽復合物溶液。

6.根據權利要求5所述的一種食用菌蛋白肽-硒螯合物的制備方法，其特征在于：步驟（2）中所述酶采用堿性蛋白酶、中性蛋白酶或復合蛋白酶。

7.根據權利要求1所述一種食用菌蛋白肽-硒螯合物的制備方法，其特征在于步驟（3）中，所述固體高溫混合法制備多肽-硒螯合物制備的具體操作如下：將亞硒酸鈉粉末和食用菌蛋白肽凍干粉按照質量比1:6-5:6混合，高溫100-150℃加熱制備食用菌蛋白肽-硒螯合物。

8.根據權利要求1所述一種食用菌蛋白肽-硒螯合物的制備方法，其特征在于步驟（3）中，所述液體螯合法制備多肽-硒螯合物的具體步驟如下：將食用菌蛋白多肽復合物溶液與0.5-2mol/L亞硒酸鈉溶液混合，兩者體積比為6:1-6:5，攪拌均勻，調節pH為3.0-10.0，在30-80℃條件下持續反應1.0-2.0h，反應后冷卻，離心分離去除雜質，濾液加入3-5倍體積的75-95%v/v乙醇，沉淀靜置12-24h，離心去除上清液，獲得食用菌蛋白肽-硒螯合物。