[發明專利]一種同時測定滴眼液中多種抑菌劑的檢測方法

有效

• 申請號: 201610183765.2
• 申請日: 2016-03-28
• 公開（公告）號: CN105866268B
• 公開（公告）日: 2017-12-15
• 發明（設計）人: 趙敬丹;秦峰;聞宏亮;范迪;裘亞;繆天瑤;劉浩;楊美成
• 申請（專利權）人: 上海市食品藥品檢驗所
• 主分類號: G01N30/02
• 分類號: G01N30/02
• 代理公司: 上海申新律師事務所31272
• 代理人: 竺路玲

技術領域

本發明涉及滴眼液中抑菌劑的測定方法，具體涉及一種同時測定滴眼液中多種抑菌劑的檢測方法。

背景技術

滴眼液系指眼用制劑中的滴眼劑，是一種將藥物成分與藥用添加劑均勻混入基質，制備成溶液、懸濁液、乳濁液的液體無菌制劑。滴眼液直接作用于眼部，通過局部黏膜吸收，大多發揮局部治療作用。

滴眼液中藥物可以直接接觸藥物作用部位，并且利用眼部黏膜吸收速度快的優勢，快速完成藥物吸收、分布，具有十分顯著的速效作用與定向作用，在眼科疾病檢查與治療領域有不可替代的作用。按照中國藥品現行法定最低標準《中國藥典》2015年版規定，滴眼液屬于液體無菌制劑，必須保持清潔和無菌的狀態，以避免主成分分解、眼部二次感染等危害。按照現行《中國藥典》規定，滴眼液制備處方中可以添加一定量的抑菌劑，以保持無菌狀態。

目前，各類滴眼液中，添加抑菌劑的種類與劑量存在顯著差異，這對藥品成分篩查、制備工藝、科學研究、監督檢驗等工作造成一定困難。對于滴眼液中抑菌劑的種類與劑量的測定，現有的方法僅能對某一特定抑菌劑進行測定，或對某一特定類的幾種抑菌劑進行測定，無法同時完成多種類、大數量的抑菌劑定性與定量檢測。隨著我國藥品質量控制要求的日漸提高，需要一種更為快捷、方便、準確、全面的滴眼液中抑菌劑測定方法，以滿足實際情況的需要。

發明內容

針對現有技術在完成滴眼液中抑菌劑的定性與定量檢測中存在的頻繁更換色譜系統、分析速度緩慢、多次重復分析、單次分析覆蓋面窄的問題，本發明提供了一種同時測定滴眼液中多種抑菌劑的檢測方法，本發明提供的檢測方法僅需一次實驗即可完成滴眼液中6類共計11種抑菌劑的種類鑒定及其含量測定，而不必更換色譜系統進行多次分析，具備操作簡單、分析速度快、定量分析準確的特點，且本發明可以適用于幾乎全部劑型，如溶液、懸濁液、乳濁液型滴眼液中的抑菌劑檢查，適用范圍廣。

為實現上述目的，本發明采用以下技術方案，具體包括以下步驟：

步驟一、制備對照品溶液

分別精密稱定氯己定、苯甲醇、三氯叔丁醇、山梨酸、苯甲酸、對羥基苯甲酸甲酯、對羥基苯甲酸乙酯、對羥基苯甲酸丙酯、硫柳汞、苯扎氯銨和苯扎溴銨對照品，加甲醇使溶解，于容量瓶中加50％甲醇溶液稀釋至刻度，搖勻，分別制成濃度分別約為10、240、500、500、100、15、40、20、30和20μg·mL^-1的對照品溶液；

步驟二、對待測滴眼液進行預處理

取待測滴眼液，將其過濾即為供試品溶液；

步驟三、通過高效液相色譜法測定對照品溶液

分別精密量取步驟一所述對照品溶液0.4，0.8，1，2，4，10，20mL，分別置于100mL量瓶中，用50％甲醇溶液稀釋至刻度，搖勻，制成7個系列濃度的對照品溶液，按以下色譜方法進樣分析：

色譜柱：Waters XBridge C18(4.6mm×150mm，5μm)；檢測波長為214nm；流動相A為0.1％磷酸溶液，流動相B為甲醇，流動相C為四氫呋喃；線性梯度洗脫條件為：0-3min，50％A、43％B、7％C，3-8min，50-5％A、43-88％B、7％C，8-10min，5％A、88％B、7％C，10-11min，5-50％A、88-43％B、7％C，11-16min，50％A、43％B、7％C；流速：1.0mL·min^-1；

分別取對照品溶液5μL進樣分析，記錄不同色譜峰的保留時間與峰面積，以不同色譜峰的保留時間用于待測滴眼液中抑菌劑的定性分析，并以對照品溶液的濃度為橫坐標，峰面積為縱坐標，繪制標準曲線并擬合回歸方程，用于待測滴眼液中抑菌劑的定量分析；

對照品溶液加50％甲醇逐步稀釋，進樣分析，取儀器信噪比為3：1時溶液的濃度為各成分的檢測限；

步驟四、鑒別、測定經過預處理后的滴眼液中抑菌劑的種類及含量

將步驟二中所述經過預處理的待測滴眼液按步驟三中所述液相色譜方法進行分析，記錄保留時間與色譜峰面積，通過保留時間比對，鑒別滴眼液中抑菌劑的品種，將記錄所得色譜峰面積套用回歸方程計算，得到滴眼液中抑菌劑的含量。

本發明的技術方案，與現有技術相比，具有如下技術效果：

本發明采用的液相色譜分析方法定性、定量效果準確，同時檢測的抑菌劑種類多、品種多，檢測速度快，本發明可以適用于不同廠家生產的不同品牌的滴眼液，適用范圍廣，效果穩定可靠。

附圖說明