[發明專利]柳樹育種材料的保存方法

有效

• 申請號: 201610181955.0
• 申請日: 2016-03-28
• 公開（公告）號: CN105724368B
• 公開（公告）日: 2018-03-30
• 發明（設計）人: 李敏;張健;張遠;李玉娟;馬祥建;王瑩;談峰
• 申請（專利權）人: 江蘇沿江地區農業科學研究所
• 主分類號: A01N3/00
• 分類號: A01N3/00
• 代理公司: 上海唯源專利代理有限公司31229
• 代理人: 曾耀先

技術領域

本發明涉及植物育種材料保存領域，特指一種柳樹育種材料的保存方法。

背景技術

柳樹是世界上物種最多的屬之一。由于柳樹的生態多樣性、遺傳多樣性十分豐富，尤其是它們廣泛的適應性，即對不良生境的抗逆性非常突出，利用途徑多，因此又被譽為“社會與環境的資源”。

柳樹雜交容易、可配性高、易無性繁殖，選育并采用優良無性系造林，可有效地利用雜種優勢，顯著提高柳樹造林效益。所以，提供一種柳樹育種材料的保存方法能夠長時間保存柳樹育種材料顯得尤為重要。

發明內容

本發明的目的在于克服現有技術的缺陷，提供一種柳樹育種材料的保存方法，解決現有技術中無法長時間保存柳樹育種材料的問題。

實現上述目的的技術方案是：

本發明一種柳樹育種材料的保存方法，包括：

選取柳樹花枝作為柳樹育種材料，并對所選取的柳樹花枝的剪口進行蠟封；

對經蠟封的柳樹花枝進行消毒處理；

對經消毒處理的柳樹花枝進行預處理，所述預處理包括將柳樹花枝浸泡于預處理液中，所述預處理液為包含有丙三醇和蔗糖的混合液；

對經預處理的柳樹花枝進行凝膠處理；

對經凝膠處理的柳樹花枝進行脫水預冷處理，所述脫水預冷處理包括將柳樹花枝浸泡于脫水防凍溶液中，所述脫水防凍溶液為包含有是丙三醇、乙二醇、二甲基亞砜、蔗糖以及聚乙烯吡咯烷酮的混合液；

對經脫水預冷處理的柳樹花枝進行超低溫保存，所述超低溫保存包括利用錫箔紙包裹柳樹花枝，并置于液氮中保存。

采用上述方法進行柳樹育種材料的保存，保存的時間長，且柳樹育種材料不易失活，保存的時間至少為2年。為柳樹的選育提供有效的幫助，能夠顯著提高柳樹的造林效益。

本發明柳樹育種材料的保存方法的進一步改進在于，對經蠟封的柳樹花枝進行消毒處理，包括：

將柳樹花枝利用自來水流水洗凈；

洗凈后將柳樹花枝放置于多菌靈可濕性粉劑稀釋800倍的溶液中浸泡，浸泡時間為4分鐘至6分鐘。多菌靈可視性粉劑為含45％硫磺三環唑。

本發明柳樹育種材料的保存方法的進一步改進在于，對經消毒處理的柳樹花枝進行預處理時，將所述柳樹花枝與所述預處理液一起放在0℃的冰水中處理60分鐘至70分鐘。

本發明柳樹育種材料的保存方法的進一步改進在于，所述預處理液中包括2mol/L的丙三醇和0.4mol/L的蔗糖。

本發明柳樹育種材料的保存方法的進一步改進在于，對經預處理的柳樹花枝進行凝膠處理，包括：

將柳樹花枝進入2％的海藻酸鈉溶液中20秒至40秒。

本發明柳樹育種材料的保存方法的進一步改進在于，對柳樹花枝進行脫水預冷處理，還包括：

將柳樹花枝浸泡于所述脫水防凍溶液中后，一起放置在0℃冰水中20分鐘至40分鐘；

而后移入-20℃冰中放置60分鐘至90分鐘；

再轉入-70℃中放置20分鐘至40分鐘。

本發明柳樹育種材料的保存方法的進一步改進在于，所述脫水防凍溶液中包括300g/L的丙三醇、150g/L的乙二醇、150g/L的二甲基亞砜、0.4mol/L的蔗糖以及50g/L的聚乙烯吡咯烷酮。

具體實施方式

下面結合具體實施例對本發明作進一步說明。

本發明提供了一種柳樹育種材料的保存方法，適用于長時間低溫保存柳樹育種材料，為柳樹的選育選配提供幫助。本發明的柳樹育種材料的保存方法能夠保存柳樹育種材料至少兩年，且保存的育種材料不易失活。下面對本發明柳樹育種材料的保存方法進行說明。

本發明的柳樹育種材料的保存方法包括：

柳樹育種材料選擇：選取柳樹花枝作為柳樹育種材料，并對選取的柳樹花枝的剪口進行蠟封。較佳地，在12月中旬，選擇無病蟲害且具有飽滿花芽的柳樹花枝作為柳樹育種材料，該柳樹花枝的粗度一般選擇在1.8cm至2cm，柳樹花枝的長度為50cm左右。

柳樹育種材料的消毒處理：對經蠟封的柳樹花枝進行消毒處理，消毒處理包括：將柳樹花枝利用自來水流水洗凈；洗凈后將柳樹花枝放置于多菌靈可濕性粉劑(含45％硫磺三環唑)稀釋800倍溶液中浸泡，浸泡時間為4分鐘至6分鐘，較佳浸泡時間為5分鐘。