[發明專利]一種高強度血清白蛋白骨修復材料及其制備方法

有效

• 申請號: 201610177027.7
• 申請日: 2016-03-24
• 公開（公告）號: CN105777893B
• 公開（公告）日: 2019-10-25
• 發明（設計）人: 汪偉;李丹;朱家喜;何銘鋒;俞益雷;李綠巍;許利利;朱明華
• 申請（專利權）人: 杭州亞慧生物科技有限公司
• 主分類號: C07K14/765
• 分類號: C07K14/765;C07K1/107;A61L31/04;A61L31/14
• 代理公司: 浙江杭州金通專利事務所有限公司 33100
• 代理人: 徐飛虎;徐關壽

1.一種高強度血清白蛋白骨修復材料的制備方法，所述方法包括如下步驟：

(a)配制溶解硫醇化血清白蛋白的溶液體系，每體積溶液中含有75％-94.95％的三氟乙醇(v/v)，5％-20％的0.01M-2.0M的無機堿(v/v)，0.05％-5％的β-巰基乙醇(v/v)；

(b)、將硫醇化血清白蛋白溶于上述溶液中，最終溶液中含有5％-30％(w/v)的硫醇化血清白蛋白；所述的硫醇化血清白蛋白由包括如下步驟的方法制備：

(1)將血清白蛋白與2-亞氨基四氫噻吩(2-IT)在含水溶劑中混合，在溶劑中2-IT的濃度相對血清白蛋白濃度為2-20倍摩爾過量；

(2)充分反應后，反應產物裝入透析袋中透析，透析液經凍干得到硫醇化血清白蛋白；

(c)、將硫醇化血清白蛋白溶液靜置，待反應完全后倒掉上層液體，將下層具有較大粘度的硫醇化血清白蛋白溶液加入到模具中，待干燥凝固后，打開模具即得血清白蛋白骨修復材料。

2.根據權利要求1所述的方法，其特征在于：所述方法步驟(a)中，溶解硫醇化血清白蛋白的溶液體系中每體積溶液中含有80％-90％的三氟乙醇(v/v)，8％-15％的0.01M-2.0M的無機堿(v/v)，1％-5％的β-巰基乙醇(v/v)。

3.根據權利要求1所述的方法，其特征在于：所述方法步驟(a)中，所述溶液中的無機堿選自氨水、氫氧化鈉、碳酸鈉、碳酸氫鈉、磷酸氫二鈉、磷酸鈉或其混合物。

4.根據權利要求3所述的方法，其特征在于：所述方法步驟(a)中，所述溶液中的無機堿為氨水。

5.根據權利要求1所述的方法，其特征在于：所述方法步驟(a)中，無機堿的摩爾濃度為0.01-1M。

6.根據權利要求5所述的方法，其特征在于：所述方法步驟(a)中，無機堿的摩爾濃度為0.1-0.2M。

7.根據權利要求1所述的方法，其特征在于：所述方法步驟(b)中，最終溶液中含有10％-20％(w/v)的硫醇化血清白蛋白。

8.根據權利要求1所述的方法，其特征在于：所述方法中的血清白蛋白來源是人、牛、馬、羊或老鼠血清白蛋白。

9.根據權利要求8所述的方法，其特征在于：所述方法中的血清白蛋白為人血清白蛋白。

10.根據權利要求9所述的方法，其特征在于：所述方法中的血清白蛋白通過基因工程重組表達生產，或者從人或者動物血漿中提取。

11.根據權利要求1所述的方法，其特征在于：所述方法步驟(b)中的含水溶劑為水或能維持溶液pH為6.0-10.0、濃度為1-100mmol/L的任一種緩沖溶劑，任選自磷酸緩沖液、磷酸氫二鈉-檸檬酸緩沖液、TRIS、甘氨酰基-甘氨酸、N-二(羥乙基)甘氨酸、磷酸二氫鈉緩沖液、磷酸氫二鈉緩沖液、醋酸鈉緩沖液、碳酸鈉緩沖液、磷酸鈉緩沖液、賴氨酸緩沖液、精氨酸緩沖液或其混合物。

12.根據權利要求11所述的方法，其特征在于：所述方法步驟(b)中的含水溶劑為注射用水或磷酸緩沖液。

13.根據權利要求11所述的方法，其特征在于：所述方法步驟(b)中緩沖劑的pH值范圍為7-9。

14.根據權利要求13所述的方法，其特征在于：所述方法步驟(b)中緩沖劑的濃度為5-50mmol/L。

15.根據權利要求14所述的方法，其特征在于：所述方法步驟(b)中緩沖劑的濃度為10-30mmol/L。