[發(fā)明專利]一種從D-乳酸鈉發(fā)酵液中分離提取D-乳酸的方法

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• 申請?zhí)枺?/td>: 201610158674.3
• 申請日: 2016-03-18
• 公開（公告）號: CN107201384A
• 公開（公告）日: 2017-09-26
• 發(fā)明（設(shè)計）人: 方曉江;劉經(jīng)偉;李澤壯;楊愛武
• 申請（專利權(quán)）人: 中國石化揚子石油化工有限公司;中國石油化工股份有限公司
• 主分類號: C12P7/56
• 分類號: C12P7/56;C12R1/01
• 代理公司: 南京知識律師事務(wù)所32207
• 代理人: 高玲玲

1.一種從D-乳酸鈉發(fā)酵液中分離純化D-乳酸的方法，其特征在于包括以下步驟：

(1)將D-乳酸鈉發(fā)酵液進行固液分離及部分蛋白和色素的去除，得到澄清的發(fā)酵液；

(2)將發(fā)酵液濃縮、酸化、冷卻結(jié)晶得到的固液混合物進行過濾，將過濾后的發(fā)酵液進行離子交換；

(3)離子交換后的發(fā)酵液進行納濾脫色，最后濃縮獲得D-乳酸。

2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于：所述D-乳酸鈉發(fā)酵液的制備包括以下步驟：

(1)將芽孢桿菌BS1-5接種至平板培養(yǎng)基厭氧培養(yǎng)，培養(yǎng)溫度30～45℃，培養(yǎng)時間20～48h；

(2)將經(jīng)步驟(1)平板培養(yǎng)的的芽孢桿菌接種至種子培養(yǎng)基厭氧培養(yǎng)，培養(yǎng)溫度30～45℃，培養(yǎng)時間12～24h；

(3)將步驟(2)獲得的種子培養(yǎng)液接種至發(fā)酵培養(yǎng)基中進行發(fā)酵產(chǎn)酸，接種量為1％～15％，發(fā)酵溫度30～45℃，通入氮氣保持其厭氧的環(huán)境，采用中和劑將發(fā)酵體系的pH控制在4.5～7.0。

3.根據(jù)權(quán)利要求2所述的方法，其特征在于：所述平板培養(yǎng)基包括以下組分：葡萄糖10～30g/L，酵母膏1～3g/L，無水乙酸鈉1～4g/L，無水硫酸鎂0.1～0.4g/L，磷酸二氫鉀1～3g/L，瓊脂15～25g/L。

4.根據(jù)權(quán)利要求2所述的方法，其特征在于：所述種子培養(yǎng)基包括以下組分：葡萄糖10～40g/L，酵母膏1～3g/L，蛋白胨1～3g/L，無水硫酸鎂0.1～0.4g/L，碳酸鈣10～30g/L。

5.根據(jù)權(quán)利要求2所述的方法，其特征在于：所述發(fā)酵培養(yǎng)基包括以下組分：葡萄糖150～180g/L，酵母膏4～8g/L，玉米漿干粉4～6g/L，硫酸鎂0.4～0.6g/L，麩皮8～12g/L。

6.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于：所述步驟1中發(fā)酵液的固液分離采用離心或者微濾的方式。

7.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于：所述步驟1中部分蛋白和色素的去除采用超濾膜去除，所采用超濾膜的截留分子量為2000～5000D。

8.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于：所述步驟2中酸化采用濃硫酸進行酸化，所述冷卻結(jié)晶的溫度控制范圍0～10℃。

9.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于：所述步驟2中離子交換采用陽離子樹脂和陰離子樹脂相結(jié)合的方法進行，發(fā)酵液先過陽離子柱再過陰離子柱，陽離子交換樹脂為732陽離子樹脂，陰離子樹脂為717陰離子樹脂。

10.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于：所述步驟3中脫色步驟采用納濾膜進行脫色， 所采用納濾膜的截留分子量為300～500。