[發明專利]一種磁性固定化磷脂酶C和磁性固定化磷脂酶A2聯合應用對大豆毛油進行脫膠的方法

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• 申請號: 201610136813.2
• 申請日: 2016-03-10
• 公開（公告）號: CN105567422A
• 公開（公告）日: 2016-05-11
• 發明（設計）人: 于殿宇;王立琦;江連洲;劉天一;張旭;張青;王文華;劉欣;齊曉芬;李中賓;王玉琦
• 申請（專利權）人: 東北農業大學
• 主分類號: C11B3/00
• 分類號: C11B3/00
• 代理公司: 暫無信息
• 代理人: 暫無信息

技術領域

本發明涉及一種磁性固定化磷脂酶C和磁性固定化磷脂酶A₂聯合應用對大豆毛油進行脫膠的方法。

背景技術

植物油精煉一般包括脫膠、脫酸、脫色、脫蠟和脫臭等工序。脫膠是毛油精煉的第一工序,用于從毛油除去磷脂和粘液物質。毛油中的磷脂分為水化磷脂和非水化磷脂，水化磷脂具有親水性，非水化磷脂含量較高的毛油適合生物酶法脫膠。酶法有反應專一,反應條件溫和和較少的環境污染等優點,使其更具有競爭力。與傳統的水化脫膠工藝相比,酶法脫膠可大大節約化學物質的消耗量，幾乎不產生廢水，在環保、經濟、質量等方面具有潛在的優勢。游離的磷脂酶對環境要求高，效率低，反應后油脂中游離脂肪酸含量升高，酶解效率不高。磁性固定化酶的使用解決了這一問題，酶經磁性固定后便于在反應結束后進行分離，并可以提高其使用的次數。

磷脂酶C(PLC)水解磷脂Sn-3位上磷酸酯鍵，主要酶解大豆毛油中的卵磷脂(PC)及腦磷脂(PE)，生成甘油二酯(DAG)及磷酸類產物，將磷脂轉化成DAG，甘油二酯溶于油中成為食用油的一部分，不需要脫膠過程，從而提高了毛油脫膠的精煉率。磷脂酶A₂(PLA₂)是一種能夠特異性酶解磷脂中Sn-2位上酰基的酶，且酶解后不發生酰基轉移，產生的游離脂肪酸較少，避免了酸價的升高。因此，采用PLC和PLA₂脫膠，可提高脫膠油的得率。

發明內容

本發明公開了一種磁性固定化PLC和磁性固定化PLA₂連用對大豆毛油進行脫膠的方法，利用PLC水解磷脂Sn-3位上磷酸酯鍵，酶解大豆毛油中的PC及PE，生成DAG及磷酸類產物，提高油脂得率，先采用PLC進行酶法脫膠操作，而后利用PLA₂特異性酶解磷脂中Sn-2位上酰基的酶，且酶解后不發生酰基轉移，產生的游離脂肪酸較少的特點脫除非水化磷脂。用磁性固定化PLC和磁性固定化PLA₂來進行脫膠的方法通過以下步驟實現：一、PLC和PLA₂的磁性固定化；二、磁性固定化PLC和磁性固定化PLA₂連用脫膠；三、測定脫膠油中的磷含量。

具體實施方式

具體實施方式一：一種磁性固定化PLC和磁性固定化PLA₂聯合應用對大豆毛油進行脫膠的方法，通過以下步驟實現：

步驟一：PLC和PLA₂的磁性固定化：首先將lg的Fe₃O₄/SiOx-g-P(GMA)復合粒子置于在50mL的磷酸緩沖液(0.1M，pH7.0)中浸泡24h，磁分離后將上述浸泡后的載體加入到一定量的含0.2％的磷脂酶的磷酸緩沖液(0.1M，pH6.5)中，同時在45℃下攪拌反應一段時間，最后磁分離并用磷酸緩沖液(0.1M，pH7.0)洗滌得到固定化PLC。將所得的固定化酶放置在冰箱內4℃下保存。將lg的Fe₃O₄/SiOx-g-P(GMA)納米復合粒子置于在50mL的磷酸緩沖液(0.1M，pH7.0)中浸泡24h，磁分離后將上述浸泡后的載體加入到一定量的含0.2％的磷脂酶的磷酸緩沖液(0.1M，pH7.0)中，同時在45℃下攪拌反應一段時間，最后磁分離并用磷酸緩沖液(0.1M，pH7.0)洗滌得到固定化PLA₂。將所得的固定化酶放置在冰箱內4℃下保存。