[發(fā)明專(zhuān)利]續(xù)隨子二萜醇衍生物的轉(zhuǎn)化方法及其在制備抗腫瘤藥物中的用途

有效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 201610129194.4
• 申請(qǐng)日: 2016-03-08
• 公開(kāi)（公告）號(hào): CN107164422B
• 公開(kāi)（公告）日: 2021-01-22
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 程志紅;吳亦晴
• 申請(qǐng)（專(zhuān)利權(quán)）人: 復(fù)旦大學(xué)
• 主分類(lèi)號(hào): C12P15/00
• 分類(lèi)號(hào): C12P15/00;A61K31/122;A61K31/22;A61P35/00
• 代理公司: 上海元一成知識(shí)產(chǎn)權(quán)代理事務(wù)所(普通合伙) 31268
• 代理人: 吳桂琴

本發(fā)明屬生物藥物領(lǐng)域，涉及續(xù)隨子二萜烷型化合物的微生物轉(zhuǎn)化方法。本發(fā)明利用諾卡氏菌Nocardia sp.NRRL 5646對(duì)續(xù)隨子二萜醇及7?羥基續(xù)隨子二萜醇進(jìn)行微生物轉(zhuǎn)化，制備得到3?羰基續(xù)隨子二萜醇和7?乙酰氧基續(xù)隨子二萜醇衍生物；經(jīng)實(shí)驗(yàn)證實(shí)，其中的3?羰基二萜醇極性降低，較底物具有更好的細(xì)胞毒活性，為具開(kāi)發(fā)價(jià)值的抗腫瘤先導(dǎo)化合物。

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明屬生物藥物領(lǐng)域，涉及續(xù)隨子二萜烷型化合物的轉(zhuǎn)化方法，具體涉及利用已知微生物對(duì)續(xù)隨子二萜醇及其衍生物進(jìn)行微生物轉(zhuǎn)化，制備具有抗癌活性的續(xù)隨子二萜烷型衍生物。

背景技術(shù)

現(xiàn)有技術(shù)公開(kāi)了續(xù)隨子二萜烷型化合物屬于二萜骨架的天然產(chǎn)物，具有較明顯的抗腫瘤活性與抗腫瘤多藥耐藥性（MDR）。構(gòu)效關(guān)系研究表明，其母核上取代基的差異能明顯改變?cè)擃?lèi)化合物的抗腫瘤活性和MDR活性。

有研究公開(kāi)了續(xù)隨子二萜烷型化合物是從大戟科植物續(xù)隨子Euphorbia lathyris L.中首次分離得到（Tetrahedron Letters, 1971, 18: 1325-1328）。隨后從其他植物中也陸續(xù)分離得到多種續(xù)隨子二萜烷型衍生物，如從大戟科植物Euphorbia lagascae中分離得到5個(gè)具有誘導(dǎo)腫瘤細(xì)胞凋亡和抗腫瘤多藥耐藥性的續(xù)隨子二萜醇酯衍生物（Planta Medica, 2005, 72: 162-168）。現(xiàn)階段研究表明，續(xù)隨子烷型二萜除了具有細(xì)胞毒活性、抗腫瘤多藥耐藥性外，還具有一定的抗艾滋病毒活性（Journal of NaturalProducts, 2011, 74: 1221-1229）。目前，對(duì)續(xù)隨子二萜烷型化合物的結(jié)構(gòu)修飾主要停留在對(duì)其側(cè)鏈酯鍵的水解和側(cè)鏈羥基的酰化等方面，其中也得到了一些活性更好的抗腫瘤多藥耐藥性衍生物（Bioorganic Medicinal Chemistry, 2014, 22: 6392-6400）。為了發(fā)現(xiàn)活性更強(qiáng)的續(xù)隨子二萜烷型先導(dǎo)化合物，有必要探索其他方法對(duì)該類(lèi)化合物進(jìn)行結(jié)構(gòu)修飾，以進(jìn)一步探索和發(fā)現(xiàn)其結(jié)構(gòu)與活性之間的關(guān)系。

微生物轉(zhuǎn)化是利用微生物生長(zhǎng)過(guò)程中合成的特異酶完成特定生化反應(yīng)。據(jù)報(bào)道，微生物在生長(zhǎng)過(guò)程中可以合成多種酶，催化不同反應(yīng)，例如氧化反應(yīng)、還原反應(yīng)、水解反應(yīng)、脫氫反應(yīng)、縮合反應(yīng)和開(kāi)環(huán)反應(yīng)等，這類(lèi)酶催化反應(yīng)具有特異性和專(zhuān)屬性，相對(duì)于化學(xué)反應(yīng)，在底物的非活性碳原子上進(jìn)行反應(yīng)更高效環(huán)保。

因此，利用微生物對(duì)續(xù)隨子二萜烷型化合物進(jìn)行轉(zhuǎn)化研究，以期獲得一些難以用傳統(tǒng)化學(xué)合成制備的特異位點(diǎn)的轉(zhuǎn)化產(chǎn)物，迄今為止尚未見(jiàn)有關(guān)續(xù)隨子二萜類(lèi)化合物的微生物轉(zhuǎn)化研究的報(bào)道。

發(fā)明內(nèi)容

本發(fā)明的目的是提供續(xù)隨子二萜烷型化合物結(jié)構(gòu)改造的方法，具體涉及通過(guò)微生物轉(zhuǎn)化法制備具有抗癌活性的續(xù)隨子二萜烷衍生物。

本發(fā)明使用諾卡氏菌 (Nocardia sp. NRRL 5646) 分別對(duì)續(xù)隨子二萜醇(Lathyrol)和7β-羥基續(xù)隨子二萜醇（7β-hydroxylathyrol）進(jìn)行了微生物轉(zhuǎn)化，獲得式（Ⅰ）結(jié)構(gòu)通式的續(xù)隨子烷型二萜衍生物：

（Ⅰ）

經(jīng)鑒定，所獲得的續(xù)隨子烷型二萜衍生物化合物為：

化合物1 3-羰基續(xù)隨子二萜醇：R₁ = =O, R₂ = H

化合物2 7β-乙酰氧基續(xù)隨子二萜醇：R₁ = β-OH, R₂ = OAc 。