[發明專利]雞白血病內源病毒ev21分子標記及其引物、鑒定方法、應用有效
| 申請號： | 201610127019.1 | 申請日： | 2016-03-07 |
| 公開（公告）號： | CN105671202B | 公開（公告）日： | 2019-04-19 |
| 發明（設計）人： | 李蘭會;張秀玲;李祥龍;張樂超;劉春楊;臧素敏;周榮艷 | 申請（專利權）人： | 河北農業大學;河北科技師范學院 |
| 主分類號： | C12Q1/70 | 分類號： | C12Q1/70;C12Q1/686;C12N15/11;C12R1/93 |
| 代理公司： | 北京超凡志成知識產權代理事務所(普通合伙) 11371 | 代理人： | 李進 |
| 地址： | 071001 *** | 國省代碼： | 河北;13 |
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| 摘要： | |||
| 搜索關鍵詞： | 白血病 內源 病毒 ev21 分子 標記 及其 引物 鑒定 方法 應用 | ||
1.一種雞白血病內源病毒ev21的分子標記，其堿基序列為SEQ ID NO:1所示。
2.權利要求1所述ev21的分子標記的分子鑒定引物，其堿基序列分別為SEQ ID NO:2和SEQ ID NO:3所示。
3.一種雞白血病內源病毒ev21的分子鑒定方法，其特征在于，包括：
提取待檢樣本的DNA作為模板，用SEQ ID NO:2和SEQ ID NO:3所示引物對所述DNA進行PCR擴增并將得到的擴增產物SEQ ID NO:1進行電泳分析。
4.如權利要求3所述的雞白血病內源病毒ev21的分子鑒定方法，其特征在于，所述PCR擴增的反應體系為：
5.如權利要求4所述的雞白血病內源病毒ev21的分子鑒定方法，其特征在于：
所述正向引物和反向引物的濃度為8～12μM；
所述DNA模板濃度為50～150ng/ul。
6.如權利要求5所述的雞白血病內源病毒ev21的分子鑒定方法，其特征在于，所述PCR擴增反應體系的相應反應程序為：
7.如權利要求1所述的雞白血病內源病毒ev21的分子鑒定方法，其特征在于，所述電泳為瓊脂糖濃度為0.8～1％的瓊脂糖凝膠電泳；電泳的電壓為130～150V恒壓，電泳時間為20～25分鐘。
8.如權利要求3所述的雞白血病內源病毒ev21的分子鑒定方法，其特征在于，在進行所述電泳分析時，對結果的分析方法為：若樣本的DNA能擴增出堿基序列如SEQ ID NO:1所示的目的片段，則該樣本對應的雞體內攜帶ev21基因。
9.權利要求3～8任一項所述的雞白血病內源病毒ev21的分子鑒定方法在快慢羽種雞內源白血病病毒ev21的分子凈化中的應用。
10.權利要求3～8任一項所述的雞白血病內源病毒ev21的分子鑒定方法在快慢羽表型鑒定中的應用。
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