[發明專利]具有修飾的免疫球蛋白重鏈序列的非人類動物

在審

• 申請號: 201610108967.0
• 申請日: 2014-02-20
• 公開（公告）號: CN105734081A
• 公開（公告）日: 2016-07-06
• 發明（設計）人: J·麥克沃克;C·古爾;K·A·梅格爾;其他發明人請求不公開姓名
• 申請（專利權）人: 瑞澤恩制藥公司
• 主分類號: C12N15/85
• 分類號: C12N15/85;C12N15/13;A01K67/027
• 代理公司: 北京商專永信知識產權代理事務所(普通合伙) 11400
• 代理人: 鄔玥;葛強

1.一種制造嚙齒動物的方法，所述方法包括在其種系基因組中修飾所述嚙齒動物以在內源免疫球蛋白重鏈基因座處包含重排的人類免疫球蛋白重鏈可變區核苷酸序列，所述重排的人類免疫球蛋白重鏈可變區核苷酸序列操作性地連接至內源重鏈恒定區基因序列，其中所述重排的重鏈可變區核苷酸序列編碼V_H3-23/X₁X₂/J_H序列，其中X₁是任意氨基酸，且X₂是任意氨基酸，且其中所述嚙齒動物是大鼠或小鼠。

2.如權利要求1所述的方法，其中X₁是Gly且X₂是Tyr。

3.如權利要求1所述的方法，其中所述人類J_H基因區段選自由以下組成的群組：J_H1、J_H2、J_H3、J_H4、J_H5、J_H6，以及其多態變體。

4.如權利要求1所述的方法，其中所述重排的人類免疫球蛋白重鏈可變區核苷酸序列編碼人類V_H3-23/GY/J_H4-4序列(SEQIDNO:137)。

5.如權利要求1所述的方法，其中所述重鏈恒定區基因序列選自C_H1、鉸鏈、C_H2、C_H3以及其組合。

6.如權利要求1所述的方法，其中實質上所有內源功能性V_H、D以及J_H基因區段從所述非人類動物的所述免疫球蛋白重鏈基因座缺失或促使其無功能。

7.如權利要求1所述的方法，進一步包括修飾所述嚙齒動物以使內源功能性V_H、D以及J_H基因區段缺失或促使其無功能。

8.如權利要求1所述的方法，其中由所述重排的重鏈可變區核苷酸序列編碼的免疫球蛋白重鏈可變域對所述嚙齒動物沒有免疫原性。

9.如權利要求1所述的方法，進一步包括修飾所述嚙齒動物以包含Adam6a基因、Adam6b基因或兩者。

10.如權利要求4所述的方法，其中所述嚙齒動物是小鼠。

11.如權利要求10所述的方法，其中修飾所述小鼠以包含Adam6a基因、Adam6b基因或兩者。

12.如權利要求10所述的方法，其中進一步修飾所述小鼠以包含編碼未重排的人類免疫球蛋白輕鏈V基因區段(V_L)和未重排的人類免疫球蛋白輕鏈J基因區段(J_L)的核苷酸序列，其中所述核苷酸序列操作性地連接至免疫球蛋白輕鏈恒定區基因序列。

13.如權利要求1所述的方法，進一步包括修飾所述嚙齒動物以包含編碼未重排的人類免疫球蛋白輕鏈V基因區段(V_L)和未重排的人類免疫球蛋白輕鏈J基因區段(J_L)的核苷酸序列，其中所述核苷酸序列操作性地連接至免疫球蛋白輕鏈恒定區基因序列。

14.如權利要求13所述的方法，其中所述輕鏈恒定區基因序列選自嚙齒動物和人類恒定區基因序列。

15.如權利要求14所述的方法，其中所述嚙齒動物選自小鼠、大鼠以及倉鼠。

16.如權利要求13所述的方法，其中所述未重排的人類免疫球蛋白輕鏈(V_L)基因區段和所述未重排的人類免疫球蛋白(J_L)基因區段在內源嚙齒動物基因座處操作性地連接至嚙齒動物免疫球蛋白恒定區基因序列。