[發明專利]基于AllGlo探針的CYP2C9*3檢測分型試劑盒及其分型方法

在審

• 申請號: 201610083701.5
• 申請日: 2016-02-06
• 公開（公告）號: CN105671153A
• 公開（公告）日: 2016-06-15
• 發明（設計）人: 張忠英;白永穎;方宜臻
• 申請（專利權）人: 廈門大學附屬中山醫院;張忠英
• 主分類號: C12Q1/68
• 分類號: C12Q1/68
• 代理公司: 廈門南強之路專利事務所(普通合伙) 35200
• 代理人: 馬應森

1.基于AllGlo探針的CYP2C9*3檢測分型試劑盒，其特征在于包括實時熒光定量PCR 試劑、陽性對照及陰性對照；

所述CYP2C9*3為美國國家生物技術信息中心所提供人10號染色體CYP2C9基因中的 SNP位點。

2.如權利要求1所述基于AllGlo探針的CYP2C9*3檢測分型試劑盒，其特征在于所述 實時熒光定量PCR試劑包括以下組份：10×Taq緩沖液、10mmol的MgCl₂、5u/μL的Taq HotstartDNA聚合酶、10mmoldNTPs混合液、50×LowROX、100mL無核酶水、10μmol/L CYP2C9*3的特異正向引物、10μmol/LCYP2C9*3的特異反向引物和AllGlo探針；所述 10×Taq緩沖液包括100mmolTris-HCl和500mmolKCl。

3.如權利要求1所述基于AllGlo探針的CYP2C9*3檢測分型試劑盒，其特征在于所述 CYP2C9*3的特異正向引物的核苷酸序列為：

SEQIDNO.1：5＇-AGCCACATGCCCTACACAGAT-3＇；

所述CYP2C9*3的特異反向引物的核苷酸序列為：

SEQIDNO.2：5＇-GAGAAACAAACTTACCTTGGGAATG-3＇。

4.如權利要求1所述基于AllGlo探針的CYP2C9*3檢測分型試劑盒，其特征在于所述 AllGlo探針為CYP2C9*3的特異探針，其核苷酸序列為：

SEQIDNO.3：CYP2C9*3-A:MAR-CCAGAGATACATTGAC-MAR；

SEQIDNO.4：CYP2C9*3-C:JUP-CCAGAGATACCTTGAC-JUP。

5.如權利要求1所述基于AllGlo探針的CYP2C9*3檢測分型試劑盒，其特征在于所述 陽性對照包括：陽性純合對照品1、陽性純合對照品2、陽性雜合對照品；所述陽性純合對照 品1為CYP2C9*3分型為AA的DNA樣品，所述陽性純合對照品2為CYP2C9*3分型為CC 的DNA樣品，所述陽性雜合對照品為CYP2C9*3分型為AC的DNA樣品。

6.如權利要求1所述基于AllGlo探針的CYP2C9*3檢測分型試劑盒，其特征在于所述 陰性對照為1mL的無核酶水。

7.基于AllGlo探針CYP2C9*3檢測分型方法，其特征在于其步驟如下：

1)采用常規方法提取EDTA抗凝全血樣本中的DNA；

2)采用如權利要求1～6中任一所述基于AllGlo探針的CYP2C9*3檢測分型試劑盒提供 的實時熒光定量PCR試劑將DNA進行實時熒光定量PCR擴增；

3)根據檢測到的熒光信號對人CYP2C9基因CYP2C9*3位點進行分型。

8.如權利要求1所述基于AllGlo探針的CYP2C9*3檢測分型試劑盒，其特征在于所述 AllGlo探針采用美國A1leLogicBiosciencesCorporation公司的熒光定量探針。