[發明專利]一種脫氮復合微生物菌劑的方法

在審

• 申請號: 201610078570.1
• 申請日: 2016-02-04
• 公開（公告）號: CN105586331A
• 公開（公告）日: 2016-05-18
• 發明（設計）人: 高玉梅;薛紅娟;宋國
• 申請（專利權）人: 常州可賽成功塑膠材料有限公司
• 主分類號: C12N11/10
• 分類號: C12N11/10;C12N11/02;C02F3/34;C02F101/38;C02F103/20
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1.一種脫氮復合微生物菌劑的方法，其特征在于具體制備步驟為：

（1）稱取大豆秸稈，去除大豆秸稈上的側枝，將去除側枝后的大豆秸稈浸泡在無水乙醇中，浸泡30～50min后，將秸稈取出并曬干，將曬干后的秸稈與碳酸鈉按質量比7:1進行混合，隨后把混合物放入粉碎機中進行粉碎，過40目篩，再把過篩后所得的顆粒放入擠壓機中擠壓成塊，將所得的塊狀物放入炭化爐中，在450～600℃下炭化4～6h；

（2）待上述炭化結束后，把炭化后的秸稈放入粉碎機中粉碎，過80目篩，將過篩后所得的炭化顆粒與炭化顆粒質量5～7％的鈦酸丁酯混合均勻后浸泡于質量分數為6％的硝酸鋰乙醇溶液，再向硝酸鋰乙醇溶液中加入炭化顆粒質量2～5％的蔗糖脂肪酸酯混合均勻，隨后將混合物移至25KHz超聲振蕩器中超聲振蕩30～35min，振蕩結束后過濾，收集過濾物放入風干機中風干，得復合微生物菌劑載體，備用；

（3）按重量份數計，取30～35份牛肉膏、20～25份蛋白胨、8～12份3g/L氯化鈉溶液、1～3份磷酸氫二鈉、1～2份磷酸二氫鈉及28～35份瓊脂攪拌均勻后，放在紫外燈下消毒殺菌，得發酵培養基，然后將發酵培養基與大豆根瘤按質量比50:1，進行混合，得混合物；

（4）將上述得到的混合物放入發酵罐中，加入量為發酵罐容積的50％，設定溫度為28～35℃，轉速設定為150～180r/min，發酵7～10天后，向發酵罐中加入混合物質量0.5～0.7％的酵母粉，然后繼續發酵5～8天，待發酵完成后，將發酵罐中的發酵混合物進行過濾，收集過濾液；

（5）將步驟（2）所得的復合微生物菌劑載體浸泡在過濾液中，在30～35℃下，靜置浸泡4～8h后過濾，得脫氮復合微生物菌劑基體，隨后將其浸泡于質量分數為0.5％的海藻酸鈉水溶液中，浸泡50～60min，然后過濾收集過濾物，將所得的過濾物放入風干機中進行風干，即可得到脫氮復合微生物菌劑。