[發明專利]七甲川吲哚花菁染料-聚乙二醇-葉酸復合物及制備方法和應用

有效

• 申請號: 201610074828.0
• 申請日: 2016-02-02
• 公開（公告）號: CN105688230B
• 公開（公告）日: 2018-12-11
• 發明（設計）人: 羅圣霖;王素軍;史春夢
• 申請（專利權）人: 史春夢
• 主分類號: A61K49/00
• 分類號: A61K49/00;C08G65/337;C08G65/333
• 代理公司: 重慶志合專利事務所(普通合伙) 50210
• 代理人: 胡榮琿

1.一種七甲川吲哚花菁染料-聚乙二醇-葉酸復合物，其特征在于，該復合物的結構式為：

2.七甲川吲哚花菁染料-聚乙二醇-葉酸復合物(IR-808-PEG-FA)的制備方法，其特征在于，有以下步驟：

a.取七甲川吲哚花菁染料、雙氨基聚乙二醇、N,N'-二環己基碳酰亞胺N-羥基琥珀酰亞胺，加入二氯甲烷、四氫呋喃和N,N二甲基甲酰胺混合溶劑，惰性氣氛，室溫下避光攪拌反應，得到IR-808-PEG；

b.取葉酸、N,N'-二環己基碳酰亞胺和N-羥基琥珀酰亞胺，加入二氯甲烷、四氫呋喃和N,N-二甲基甲酰胺混合溶劑，惰性氣氛，室溫下避光攪拌反應，活化葉酸，得到葉酸活性酯(FA-NHS)；

c.步驟a得到的IR-808-PEG溶液與步驟b中得到的葉酸活性酯FA-NHS混合，惰性氣氛，室溫下避光攪拌反應，得到IR-808-PEG-FA；

d.步驟c得到的IR-808-PEG-FA純化。

3.根據權利要求2所述的制備方法，其特征在于：所述七甲川吲哚花菁染料為其N-烷基側鏈不同鏈長(n＝1-12)，且末端為羧基的七甲川吲哚花菁染料類似物。

4.根據權利要求2所述的制備方法，其特征在于：步驟a所述N,N'-二環己基碳酰亞胺：N-羥基琥珀酰亞胺：七甲川吲哚花菁染料的摩爾比為3:3:0.5-3，所述七甲川吲哚花菁染料：雙氨基聚乙二醇的摩爾比為1:2-4；所述混合溶劑二氯甲烷：四氫呋喃：N,N-二甲基甲酰胺的體積比為3:1-1.5:1-1.5。

5.根據權利要求2所述的制備方法，其特征在于：所述雙氨基聚乙二醇兩端為氨基封端的直鏈聚合物且分子量為600-10000。

6.根據權利要求2所述的制備方法，其特征在于：步驟b所述N,N'-二環己基碳酰亞胺：N-羥基琥珀酰亞胺：葉酸的摩爾比為在3:3:0.5-3；混合溶劑二氯甲烷：四氫呋喃：二甲基亞砜的體積比為3:1-1.5:1-1.5。

7.根據權利要求2所述的制備方法，其特征在于：步驟b所述活化反應時間為10-100h。

8.根據權利要求2所述的制備方法，其特征在于：步驟c所述的IR-808-PEG：葉酸活性酯的摩爾比為1:2-4。

9.根據權利要求2所述的制備方法，其特征在于：步驟d所述的純化在避光條件下進行，其方法是：所得IR-808-PEG-FA溶液高速離心，除去沉淀，旋蒸溶液后，柱層析，收集洗脫部分，柱層析的洗脫劑為二氯甲烷和甲醇混合溶劑，其體積比為V_二氯甲烷：V_甲醇＝20:0.1-2。

10.七甲川吲哚花菁染料-聚乙二醇-葉酸復合物在制備用于高表達葉酸受體的腫瘤細胞檢測中的試劑盒的應用。