[發(fā)明專利]鴨疫里默氏桿菌OmpH截段重組蛋白及制備方法與應(yīng)用有效
| 申請?zhí)枺?/td> | 201610070599.5 | 申請日： | 2016-01-29 |
| 公開（公告）號： | CN105541977B | 公開（公告）日： | 2019-05-17 |
| 發(fā)明（設(shè)計）人： | 程安春;高群;汪銘書;朱德康;楊喬;陳孝躍 | 申請（專利權(quán)）人： | 四川農(nóng)業(yè)大學(xué) |
| 主分類號： | C07K14/195 | 分類號： | C07K14/195;C12N15/31;C12N15/70;G01N33/68;G01N33/569;A61K39/02;A61P31/04 |
| 代理公司： | 北京同恒源知識產(chǎn)權(quán)代理有限公司 11275 | 代理人： | 王貴君 |
| 地址： | 611130 四*** | 國省代碼： | 四川;51 |
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| 摘要： | |||
| 搜索關(guān)鍵詞： | 鴨疫里默氏 桿菌 omph 重組 蛋白 制備 方法 應(yīng)用 | ||
1.鴨疫里默氏桿菌OmpH截段重組蛋白應(yīng)用于作為檢測鴨疫里默氏桿菌抗體的間接ELISA方法的檢測抗原，其特征在于：所述鴨疫里默氏桿菌OmpH截段重組蛋白的氨基酸序列如SEQ ID NO:1所示。
2.權(quán)利要求1所述的應(yīng)用，其特征在于：鴨疫里默氏桿菌OmpH截段重組蛋白的DNA序列如SEQ ID NO:2所示。
3.權(quán)利要求1所述的應(yīng)用，其特征在于：所述鴨疫里默氏桿菌OmpH截段重組蛋白的制備方法具體包括以下步驟：
A、以鴨疫里默氏桿菌（
B、用限制性內(nèi)切酶BamH I和Xho I分別雙酶切pMD19-OmpHM質(zhì)粒和原核表達載體pET32a(+)，進行連接，得重組原核表達質(zhì)粒pET32a-OmpHM；
C、將步驟B提取的重組質(zhì)粒pET32a-OmpHM轉(zhuǎn)化到表達宿主菌誘導(dǎo)表達，得鴨疫里默氏桿菌截段重組蛋白粗品。
4.根據(jù)權(quán)利要求3所述的應(yīng)用，其特征在于：將步驟C所得鴨疫里默氏桿菌OmpH截段重組蛋白粗品經(jīng)鎳瓊脂糖凝膠親和層析純化后，用100mM咪唑洗脫，得鴨疫里默氏桿菌OmpH截段重組蛋白。
5.根據(jù)權(quán)利要求3所述的應(yīng)用，其特征在于：步驟C中的宿主菌為菌株BL21(DE3)，在IPTG濃度=1.2mmol/L，誘導(dǎo)溫度為25℃條件下進行誘導(dǎo)表達9小時，得鴨疫里默氏桿菌OmpH截段重組蛋白。
6.鴨疫里默氏桿菌OmpH截段重組蛋白應(yīng)用于作為預(yù)防鴨疫里默氏桿菌的基因工程亞單位疫苗，其特征在于：所述鴨疫里默氏桿菌OmpH截段重組蛋白的氨基酸序列如SEQ IDNO:1所示。
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