[發(fā)明專利]一種益生菌多糖復(fù)合制劑制備方法

在審

• 申請?zhí)枺?/td>: 201610064248.3
• 申請日: 2016-01-27
• 公開（公告）號: CN107007633A
• 公開（公告）日: 2017-08-04
• 發(fā)明（設(shè)計）人: 劉承軍;王海麗;葛長城;曲悅;侯國生;夏新萌
• 申請（專利權(quán)）人: 聊城市畜牧獸醫(yī)局;聊城職業(yè)技術(shù)學院
• 主分類號: A61K35/747
• 分類號: A61K35/747;A61P37/04;A61P3/00;A61P1/14;A61K35/742;A61K31/715
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1.一種益生菌多糖復(fù)合制劑制備方法，其特征在于，在現(xiàn)代分子免疫學和中醫(yī)學相結(jié)合的基礎(chǔ)上，采用現(xiàn)代生物技術(shù)制取，制備方法包括以下步驟：

I、復(fù)合益生菌制備：

①制備豬源乳酸桿菌膠囊

將培養(yǎng)20h的豬源乳桿菌液在4000r/min離心20min后取菌泥；以海藻酸鈉為包被壁材，以氯化鈣為固化液，兩者分別在121℃滅菌20min；將冷卻好壁材溶液與菌液在雙向恒溫磁力攪拌器上混合30分鐘均勻后，用注射器注入氯化鈣溶液，經(jīng)350r/min低速離心10min收集微膠囊顆粒，洗滌3次后取出少量樣品測定包埋效率和包埋產(chǎn)率；其余產(chǎn)品置于-20℃預(yù)凍2h，然后進行冷凍干燥處理；

②枯草芽孢桿菌與蠟樣芽孢桿桿菌菌粉的制備

將培養(yǎng)18h的枯草芽孢桿菌種子液、蠟樣芽孢桿菌種子液分別以體積分數(shù)4％接種于40L液體發(fā)酵培養(yǎng)基，于50L發(fā)酵罐中進行發(fā)酵培養(yǎng)，培養(yǎng)條件為：加入體積分數(shù)1.5％消泡劑，轉(zhuǎn)速為350r/min，通氣量為10L/min，初始Ph7.0，溫度35℃；每隔2h取樣1次，測定樣品中的產(chǎn)芽孢率，當產(chǎn)芽孢率達到90％以上時即可停止發(fā)酵；將獲得的發(fā)酵產(chǎn)物進行噴霧干燥，噴霧干燥器的進口溫度設(shè)置為146℃，出口溫度設(shè)置為110℃；噴霧干燥結(jié)束后測量產(chǎn)品質(zhì)量，并利用稀釋平板法測定單位質(zhì)量產(chǎn)品中的活菌數(shù)；

③復(fù)合益生菌產(chǎn)品的復(fù)配

將乳酸桿菌微膠囊、枯草芽孢桿菌菌粉和蠟樣芽孢桿菌菌粉按照質(zhì)量比3∶1∶1比例與適量碳酸鈣進行混合，保證產(chǎn)品中的總細菌數(shù)約等于6×10¹⁰cfu/g；

II、復(fù)合多糖制備

①黃芪多糖的提取，將黃芪根利用超微粉碎機粉碎，過300目篩絹網(wǎng)制備成黃芪粉，加入5-8倍的蒸餾水中，在80℃-90℃溫度下浸取1-3h，過濾得浸取液，浸取液放置室溫后，在適當?shù)乃俣葦嚢柘?，浸?倍體積的95％酒精中，黃芪多糖沉淀出來，用95％酒精洗滌，干燥，得出黃芪多糖粗品；

②香菇多糖提取，將香菇粉碎后根據(jù)①的步驟進行提取、純化；

③復(fù)合多糖產(chǎn)品配制，將黃芪多糖和香菇多糖根按照質(zhì)量比1∶1比例混合；

III、益生菌多糖復(fù)合制劑配制

將復(fù)合益生菌產(chǎn)品與復(fù)合多糖按照質(zhì)量比3∶1比例混合，得到益生菌-多糖復(fù)合制劑。